Средство на основе L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана, обладающее гиполипидемической активностью

Изобретение относится к биологически активным соединениям, используемым в медицине и фармацевтической промышленности. Объектом изобретения является применение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана в качестве гиполипидемического и гипохолестеринемического средства. В частных случаях L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан может быть выделен из листьев березы повислой (); может применяться в качестве средства, снижающего уровень холестерина; может применяться для терапии гиперхолестеринемий в комбинации с ингибиторами ГМГ-КоА редуктазы (статинами) или в комбинации с блокаторами белка-транспортера холестерина в кишечнике (эзетимибом). Изобретение обеспечивает расширение арсенала гиполипидемических и гипохолестеринемических средств. 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 15 табл.

1. Применение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана в качестве гиполипидемического и гипохолестеринемического средства.

2. Применение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана по п.1, выделенного из листьев березы повислой (Betula pendula L.), в качестве гиполипидемического и гипохолестеринемического средства.

3. Применение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана по п.1 в качестве средства, снижающего уровень холестерина.

4. Применение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана по п.1 в комбинации с ингибиторами ГМГ-КоА редуктазы (статины) для терапии гиперхолестеринемий.

5. Применение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана по п.1 в комбинации с блокаторами белка-транспортера холестерола в кишечнике (эзетимиб) для терапии гиперхолестеринемий.

Изобретение относится к биологически активным соединениям, используемым в медицине и фармацевтической промышленности. Средство представляет собой L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан, выделенный из листьев березы повислой (Betula pendula L.). Новое средство обладает гиполипидемической активностью.

В современной стратегии медикаментозной коррекции дислипидемий и первичной/вторичной профилактики сердечнососудистых заболеваний центральное место занимает терапия статинами. Однако в результате клинических исследований последних лет было показано, что монотерапия статинами, даже в высоких дозах, не приводит к достижению целевых значений липопротеидов низкой плотности. Более того, существуют пациенты, которые плохо переносят статины или не могут их принимать в высоких дозах (лица с хронической сердечной недостаточностью, пациенты старше 75 и моложе 21 лет, пациенты с хронической болезнью почек 3-5 стадии и находящиеся на диализе). В таких случаях также остро встает вопрос о замене статинов другими лекарственными средствами, позволяющими эффективно снижать уровень ХС-ЛПНП.

Препаратами второй линии для терапии гиперхолестеринемии/дислипидемии, после статинов, в настоящее время, являются - ингибиторы обратного захвата холестерина (эзетимиб) и секвестранты желчных кислот, препятствующие всасыванию холестерина и желчных кислот в просвете желудочно-кишечного тракта. Несмотря на высокую эффективность последних, они не имеют широкого применения в стандартах лечения в РФ. Ограниченное использование этого класса препаратов клиницистами вызвано их высокой токсичностью и частотой возникновения побочных явлений.

Известны изобретения, в которых используются экстракты или порошки растений, авторы изобретений связывают их гиполипидемическую активность, в том числе и с присутствием полисахаридов [1, 2, 3].

Известны изобретения, в которых приведено описание использование суммы полисахаридов какого-либо растения, обладающих гиполипидемической и гипохолестеринемической активностью [4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12,13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23].

Известны изобретения, связанные с использованием растительных полисахаридов для создания гиполипидемических средств, в которых описаны полисахариды, выделенные в индивидуальном виде и используемые в составе различных композиций, а также и дополнительно функционализированы [24, 25, 26, 27].

Известен способ получения пектиновых полисахаридов окры (Абельмош съедобный), обладающих высокой способностью удаления холестерина. Способ включает следующие этапы: приготовление порошка окры, экстракцию полисахаридов, осаждение неочищенных полисахаридов, очищение полисахаридов, концентрирование, удаление белков и проведение сублимационной сушки. Пектиновые полисахариды окры, полученные с помощью этого метода, обладают определенной антиоксидантной активностью, а также обладают высокой способностью удалять холестерин [19].

Известна пищевая добавка "Криласорб", которая в качестве активного вещества содержит продукт биосинтеза дрожжей Cryptococcus laurentii, включающий полисахариды. «Криласорб» представляет собой продукт, содержащий полисахариды, состоящие из остатков D-маннозы, D-ксилозы и D-глюкуроновой кислоты. Он не токсичен при пероральном применении, не всасывается в кишечнике и обладает гиполипидемической и энтеросорбционной активностью. «Криласорб» снижает повышенное содержание холестерина в сыворотке крови на 26%, триглицеридов в сыворотке крови на 45%, холестерина в печени на 15%, триглицеридов в печени на 25% [26].

Известно, что полисахарид арабиногалактан был применен в нутрицевтической композиции, которая представляет собой гомогенизированную смесь сухих порошков экстракта куркумы, экстракта черного перца, экстракта сои, экстракта листьев зеленого чая, экстракта красного корня, экстракта солодки, экстракта листьев облепихи, арабиногалактана и цинка. Композиция обладает противовоспалительными, гиполипидемическими, гипогликемическими, гепатопротекторными и одновременно противоопухолевыми свойствами [27].

Указанные выше средства, как правило, представляют собой экстрактивные комплексы или комбинации различных биологически активных веществ.

Новая техническая задача - расширение арсенала гиполипидемических средств, на основе индивидуальных веществ растительного происхождения.

Поставленную задачу решают применением в качестве гиполипидемического средства индивидуального вещества полисахаридной природы L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана.

Принципиально новое в предлагаемом изобретении гиполипидемическая активность L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана, выделенного из листьев березы повислой (Betula pendula L.), которая позволяет использовать данное вещество в качестве гиполипидемического средства. Новые свойства были обнаружены в результате экспериментальных исследований и для специалиста явным образом не вытекают из уровня техники, описание этого свойства не обнаружено авторами в патентной и научно-медицинской литературе. Таким образом, предлагаемое техническое решение соответствует критериям изобретения, а именно - «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».

Изобретение будет понятно из следующего описания и, приложенных фигур и таблиц.

L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан выделяли из листьев березы повислой (Betula pendula L.) путем водной экстракции с последующим осаждением этиловым спиртом и проведением 3-х ступенчатой очистки от сопутствующих веществ.

Подтверждение структуры.

Моносахаридный состав определяли после кислотного гидролиза трифторуксусной кислотой с добавлением миоинозитола в качестве внутреннего стандарта методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) в виде ацетатов полиолов. Содержание уроновых кислот определяли после гидролиза концентрированной серной кислотой по реакции с 2,3-динитрофенолом методом спектрофотометрии. Показано, что полисахарид березы состоит в основном из остатков галактуроновой кислоты, рамнозы, галактозы и арабинозы (табл. 1.).

Структурный анализ проводили методом ЯМР-спектроскпии на ядрах углерода-13. Предварительно методом частичного гидролиза удалялись боковые цепи, которые, как показал ГХ-анализ, состоят из арабиногалактановых участков. Далее методом ферментативного гидролиза было проведена частичная деградация основной цепи макромолекулы, с целью получения фрагментов достаточного размера, позволяющего провести их ЯМР-спектроскопический анализ. Расшифровка полученного ЯМР-спектра представлена в таблице 2. Данные ЯМР-анализа подтверждают результаты исследования мономерного состава и демонстрируют высокую степень зтерификации мономерных остатков галактуроновой кислоты (сложноэфирная группировка в 6 положении остатка GalpA). Кроме того, ЯМР-спектр позволяет определить пространственную конфигурацию мономерных звеньев полисахарида и характер связей между ними (Фиг. 1). Таким образом, на основании данных ГЖХ и ЯМР-спектроскопии доказано, что основная углеводная цепь анализируемого вещества представлена L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронаном.

Данное соединение также может быть выделено из растений других видов или получено синтетическим путем.

Фармакологические испытания

Гиполипидемическая активность L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана исследована на моделях in vivo и in vitro. В качестве препаратов сравнения использованы холестирамин («Questran», Bristol-Myers Squibb, Италия), относящейся к группе секвестрантов желчных кислот, розувастатин («Крестор», AstraZeneca, Великобритания), относящийся к группе ингибиторов ГМГ-КоА редуктазы и эзетимиб («Эзетрол», Berlin-Chemie Menarini, Германия), относящийся к блокаторам всасывания ХС в кишечнике.

Согласно руководству по доклиническим исследованиям для более объективной оценки гиполипидемического действия новых веществ исследования проведены на 2 видах животных: крысах и сирийских хомяках.

Изучение специфической гиполипидемической активности проведено согласно Руководству по проведению доклинических исследований лекарственных средств [28] и базируется на оценке in vivo влияния L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана на содержание в сыворотке крови холестерола (ХС), холестерола в липопротеинах низкой и высокой плотности (ХС-ЛПНП, ХС-ЛПВП), индекса атерогенностии (ИА) (ИА=(общий ХС - ХС-ЛПВП)/ ХС-ЛПВП), триацилглицеролов (ТАГ), желчных кислот, а также в печени - содержание ХС и ТАГ. Биохимические показатели в сыворотке крови и ткани печени измеряли с помощью ферментативных наборов фирмы Chronolab (Испания) и RANDOX (Великобритания).

При оценке данных, полученных при фармакологических испытаниях, использовали методы статистического описания и проверки статистических гипотез [29, 30]. Проверка на соответствие выборок нормальному закону распределения проводилась критерием Шапиро-Вилка. Достоверность различий независимых выборок оценивали с помощью непараметрического критерия для малых групп Манна-Уитни. Различия считались достоверными при достигнутом уровне значимости р<0,05. Результаты исследования обрабатывали с использованием программ Microsoft Excel (2007), Graph Pad Prism 5.0 (Graph Pad Soft ware, США) и SPSS Statistics17.0 (IBM, США). Результаты представлены в виде медианы (Me) и квартилей (Q1-Q3).

Хроническую гиперлипидемию у крыс моделировали высокожировой атерогенной диетой, обеспечивающей 45% энергии за счет животного жира (2,5% ХС; 0,5% холевой кислоты; 0,1% 2-тиоурацила). Экспериментальные животные получали атерогенную диету в течение 28 суток. С 29 по 42 сутки экспериментальные группы животных получали атерогенную диету с добавлением в корм L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана (3 г/100 г атерогенного корма) или препарата сравнения холестирамина (2 г/100 г атерогенного корма), поскольку лекарственные средства группы секвестрантов у пациентов принимаются с пищей.

Для формирования экспериментальной модели хронической гиперлипидемии у хомяков в синтетическую диету (AIN-93G), разработанную Американским институтом питания (American Institute of Nutrition, AIN) для грызунов AIN-93G [31, 32], добавляли 0,3% холестерола и 11% кокосового масла (атерогенная диета). Состав синтетической атерогенной диеты приведен в таблице 3. Экспериментальные животные получали синтетическую атерогенную диету в течение 21 сут. С 22 по 35 сут экспериментальные группы животных получали синтетическую атерогенную диету с добавлением в корм L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана (1,5 г, 3 г и 4,5 г/100 г атерогенного корма) или препарата сравнения холестирамина (2 г/100 г атерогенного корма). Препараты сравнения розувастатин (1 мг/кг) и эзетимиб (2 мг/кг) вводились ежедневно с 22 по 35 сут. Хомяки контрольной группы получали только синтетическую атерогенную диету в течение 35 сут.

Исследование специфической активности лекарственного средства на L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана на фоне атерогенной диеты у крыс показало, что полисахарид обладает гиполипидемическим действием. Включение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана в высокожировую диету, подобно препарату сравнения холестирамину, приводит к снижению содержания ТАГ и общего ХС в сыворотке крови крыс (табл. 4). Снижение уровня общего ХС в сыворотке крови животных при атерогенной диете обусловлено в большей степени уменьшением содержания ХС во фракции атерогенных ЛПНП (табл. 5). Кроме того, L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан способствовал снижению повышенного на фоне атерогенной диеты содержания ТАГ и ХС в печени крыс (табл. 6). При изучении содержания желчных кислот в сыворотке крови крыс, получавших высокожировую атерогенную диету, обнаружено повышение данного показателя в 1,9 раза (Р<0,05) по сравнению с показателем у здоровых животных, а включение в атерогенную диету L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана приводило к снижению уровня желчных кислот в сыворотке крови крыс (табл. 7).

В экспериментах на хомяках на фоне синтетической высокожировой атерогенной диеты L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан в дозах 3 г и 4,5 г/100 г атерогенного корма также показал гиполипидемическое действие. Включение L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана в этих дозах в синтетическую атерогенную диету, подобно холестирамину и эзетимибу, приводит к снижению содержания ТАГ, общего ХС и желчных кислот в сыворотке крови хомяков на фоне атерогенной диеты (табл. 8). Снижение уровня общего ХС в сыворотке крови животных при атерогенной диете обусловлено в большей степени уменьшением содержания ХС во фракции атерогенных ЛПНП, что приводило к уменьшению ИА (табл. 9). Кроме того, использование полисахарида способствовало снижению повышенного на фоне атерогенной диеты содержания ТАГ и ХС в печени хомяков (табл. 10).

Полученные данные о нормализации уровня желчных кислот в сыворотке крови крыс и хомяков при добавлении в корм L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана свидетельствует о том, что механизм гиполипидемического действия лекарственного средства на основе полисахарида основан на его способности связывать желчные кислоты в кишечнике, что препятствует их реабсорбции и выключению из энтерогепатической циркуляции.

Для выявления этого механизма изучена способность L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана in vitro связывать желчные кислоты. Установлено, что 10 мг L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана связывает 0,50 (0,44-0,52) мкмоль холевой кислоты, 0,74 (0,73-0,76) мкмоль дезоксихолевой кислоты, 0,57 (0,53-0,59) мкмоль гликохолевой кислоты и 0,58 (0,51-0,60) мкмоль таурохолевой кислоты (табл. 11).

По способности L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана связывать желчные кислоты, они располагаются в ряд: дезоксихолевая > гликохолевая > таурохолевая > холевая.

Известно, что на основании гидрофильно-гидрофобного индекса желчные кислоты подразделяют на гидрофильные и гидрофобные. Гидрофильные желчные кислоты обладают гепатозащитными свойствами, а гидрофобные являются гепатотоксичными, и, в зависимости от концентрации, они вызывают холестаз, некроз или апоптоз гепатоцитов [33]. Важно отметить, что связывающая способность L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана более выражена для гидрофобной дезоксихолевой кислоты в сравнении с гидрофильными желчными кислотами.

На модели атерогенной диеты у крыс выявлена способность L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана влиять на скорость секреции желчи и состав желчных кислот.

У крыс, получавших в течение 6 недель атерогенную диету, объем секретируемой желчи снижался на 47,8% (Р<0,05) по сравнению с таковыми значениями в группе интактных животных (табл. 12). При этом количество желчных кислот в желчи крыс, получавших атерогенную диету, в пересчете на 100 г веса животных или на грамм веса печени уменьшалось на 72,1 и 79,8% (Р<0,05) соответственно.

Включение в атерогенную диету L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана приводило к достоверному увеличению содержания желчных кислот в желчи в 1,4 раза (в пересчете на грамм печени) (Р<0,05) и в 1,8 раза (в пересчете на 100 г веса животного) (Р<0,05). Эффект L-рамнопиранозил-6-O-метил-d-галактуронана на скорость секреции желчи и содержание в ней ЖК сопоставим с действием холестирамина (табл. 12).

Атерогенная диета вызывала снижение содержания общих желчных кислот.При этом в пуле желчных кислот повышалось содержания холевой кислоты в 2,7 раза (р<0,05) и вторичной дезоксихолевой кислоты в 1,8 раза (р<0,05), которые обнаруживались в желчи контрольных крыс в следовых количествах (табл. 13). Атерогенная диета приводила также к перераспределению в пуле желчи тауриновых и глициновых коньюгатов холевой кислоты. Содержание таурохолевой кислоты от общего количества желчных кислот снижалось с 53,0% до 28,3%, в то время как гликохолевой повышалось со 9,2% до 30,8% (табл. 13). Известно, что повышение процентного содержания глициновых коньюгатов в желчи на фоне атерогенной диеты способствуют большей солюбилизации холестерина и рассматривается как адаптивная реакция для выведения большего количества холестерина в условиях гиперхолестеролемии [34].

L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан в дозе 3 г/100 г корма, как и препарат сравнения холестирамин (2 г/100 г корма), способствовал повышению содержания общего количества желчных кислот в желчи на 54,4% (р<0,05) и 80,6% (р<0,05) соответственно. При этом концентрация гликохолевой кислоты в желчи крыс под влиянием L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана повышалась в 1,7 раза (р<0,05), а таурохолевой кислоты не изменялась. Содержание гликохолевой и таурохолевой кислот составляло 55,4% и 21,8% от общего количества желчных кислот соответственно. Таким образом, L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан, подобно холестирамину, увеличивал концентрацию общих желчных кислот в желчи и повышал процентное содержание в их пуле глициновых коньюгатов, что способствует большей солюбилизации холестерина и его выведению с желчью в условиях гиперхолестеролемии.

При высоких концентрациях в зависимости от гидрофильно-гидрофобного индекса желчные кислоты ингибируют активность 7α-гидроксилазы и этот эффект более выражен для дезоксихолевой кислоты [35]. Кроме того, гидрофобные ЖК снижают секрецию желчи, в то время как гидрофильные ее стимулируют [33]. Этим обусловлено снижение скорости секреции желчи и содержание в ней желчных кислот на фоне такой атерогенной диеты (табл. 12).

Связывание L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронаном в кишечнике желчных кислот способствует их удалению из энтерогепатической циркуляции, что сопровождается усилением их синтеза в печени из ХС. Этот механизм гиполипидемического действия L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана подтверждается данными о его способности увеличивать экспрессию мРНК гена 7α-гидроксилазы (Сур7а1) и рецептора к ЛПНП (Ldlr) в печени крыс, величины которых значительно снижены на фоне атерогенной диеты (табл. 14). Добавление в атерогенную диету L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана (3 г/100 г атерогенного корма) приводит к увеличению величины экспрессии мРНК Сур7а1 в 2,4 раза (р<0,05), а величины экспрессии мРНК Ldlr в 1,7 раза (р<0,05) (табл. 14). Повышение величины экспрессии мРНК Сур7а1 в печени под влиянием способствует повышенной элиминации ХС в виде желчных кислот. Действительно в экспериментах установлено, что L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан повышает содержание желчных кислот в фекалиях хомяков на фоне атерогенной диеты (табл. 15).

Таким образом, гиполипидемическое действие L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана обусловлено его способностью связывать желчные кислоты в кишечнике и исключать их из энтерогепатической циркуляции. Это приводит к снижению содержания желчных кислот в гепатоцитах, что сопровождается повышением экспрессии мРНК гена 7α-гидроксилазы (Сур7а1) и рецептора к ЛПНП (Ldlr) и способствует повышенной элиминации ХС в виде желчных кислот, которые связываются в кишечнике L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронаном и выводятся с фекалиями. Увеличение экспрессии мРНК рецептора к ЛПНП приводит к повышению захвата из кровеносного русла атерогенных липопротеинов и снижению уровня ХС в крови.

Лекарственные средства группы секвестрантов широко используются в комбинированной терапии гиперлипидемии с ингибиторами ГМГ-КоА редуктазы - статинами или блокатором белка-транспортера ХС в кишечнике - эзетимибом. Совместное применение розувастатина и эзетимиба с L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронаном (3 г/100 г атерогенного корма) на модели гиперлипидемии у хомяков приводит к более выраженное гиполипидемическому эффекту. L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронан в дозе 3 г/100 г атерогенного корма снижал уровень ХС в печени хомяков на 20,5% (Р<0,01), а блокатор всасывания ХС эзетимиб на 39,9% (Р<0,01) соответственно (табл. 9). При совместном применении эзетимиба с L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронаном в дозе 3 г/100 г атерогенного корма уровень ХС в печени снижался на 54,0% (Р<0,01). Ингибитор ГМГ-КоА редуктазы розувастатин снижал данный показатель на 19,1% (Р<0,01), а при комбинированной терапии с L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронаном на 32,8% (Р<0,01) (табл. 9).

Полученные результаты свидетельствуют о возможности использования L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана в комплексной терапии гиперлипидемии.

Источники информации, принятые во внимание

1. US 7608286 (В2). 2009-10-27.

2. CN 103416744 (A) RUI. 2013-12-04.

3. RU 2173161. 10.09.2001.

4. ЕР 2010198 (А2). 2009-01-07.

5. CN 106177448 (А). 2016-12-07.

6. CN 105560310 (А). 2016-05-11.

7. CN 105266148 (А). 2016-01-27.

8. CN 104829743 (А). 2015-08-12.

9. CN 103535834 (А). 2014-09-21

10. CN 101675950 (А). 2010-03-24.

11. CN 1240393 (С). 2006-02-08.

12. CN 101658528 (В). 2011-07-20.

13. US 2016136224 (А1). 2016-05-19.

14. CN 101474235 (А). 2009-07-08.

15. CN 106389536 (А). 2017-02-15.

16. CN 105902581 (А). 2016-08-31.

17. CN 105560310 (А). 2016-05-11.

18. US 2011165273 (А1). 2011-07-07.

19. CN 106496353 (А). 2017-03-15.

20. JP S5657715 (А). 1981-05-20.

21. JP S59163323 (А). 1984-09-14.

22. CN 108948223A. 2018-12-2017.

23. RU 2621152. 2017-05-31.

24. WO 0004907 (А1). 2000-02-03.

25. US 5847109 (А). 1998-12-08.

26. RU 2177695 (С2). 2002-01-10.

27. RU 2654868. 23.05.2018.

28. Миронов А.Н., Бунятян Н.Д., Васильев А.Н. и др. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - Москва, 2013.

29. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - Пер. с англ. - М.: Практика, 1998. - 459 с.

30. Гмурман, В.Е. Теория вероятности и математическая статистика /В.Е. Гмурман. - Москва: Высшая школа, 2006. - 284 с.

31. Reeves, P.G. AIN-93 purified diets for laboratory rodents: final report of the American Institute of Nutrition ad hoc writing committee on the reformulation of the AIN-76A rodent diet / P.G. Reeves, F.H. Nielsen, G.C. Jr. Fahey // J. Nutr. - 1993. - Vol. 123, N 11. - P. 1939-1951.

32. Сравнительная характеристика влияния экспериментальных рационов на рост и развитие крыс / Н.В. Тышко, В.М, Жминченко, В.А. Пашорина и др. // Вопросы питания. - 2011. - Т. 80, №5. - С. 30-38.

33. Тюрюмин, Я.Л. Роль желчного пузыря (обзор литературы) / Я.Л. Тюрюмин, В.А. Шантуров, Е.Э. Тюрюмина // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2011. - Т. 80, №4. - С. 347-352.

34. Ide, Т. Predominant conjugation with glycine of biliary and lumen bile acids in rats fed on pectin / T. Ide, M. Horii // Br. J. Nutr. - 1989. - Vol. 61, N 3. - P. 545-557.

35. Ren, S. Regulation of oxysterol 7alpha-hydroxylase (CYP7B1) in the rat / S. Ren, D. Marques, K. Redford et al. // Metabolism. -2003. - Vol. 52, N 5. - P. 636-642.

Средство на основе L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана, обладающего гиполипидемической активностью

Фигура 1 - ЯМР-спектр выделенного полисахарида березы.

Таблица 1 - Состав, выделенного полисахарида березы.

Таблица 2 - Расшифровка полученного ЯМР-спектра, выделенного полисахарида березы.

Таблица 3 - Состав синтетической (AIN-93G) и синтетической атерогенной диеты.

Таблица 4 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана и холестирамина на содержание в сыворотке крови крыс триацилглицеролов (ТАГ) и холестерола (ХС) при экспериментальной гиперлипидемии, вызванной атерогенной диетой (Me (Q₁-Q₃), р).

Таблица 5 - Влияние L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана и холестирамина на содержание в сыворотке крови крыс холестерола в липопротеинах низкой плотности (ХС-ЛПНП), холестерола в липопротеинах высокой плотности (ХС-ЛПВП) и значения индекса атерогенности (ИА) при экспериментальной гиперлипидемии, вызванной атерогенной диетой (Me (Q₁-Q₃), р).

Таблица 6 - Влияние L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана и холестирамина на содержание в печени крыс триацилглицеролов (ТАГ) и холестерола (ХС) при экспериментальной гиперлипидемии, вызванной атерогенной диетой (Me (Q₁-Q₃), р).

Таблица 7 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана и холестирамина на содержание желчных кислот (ЖК) в сыворотке крови крыс с хронической гиперлипидемией, вызванной атерогенной диетой (Me (Q₁-Q₃), р).

Таблица 8 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана, холестирамина, розувастатина и эзетимиба на содержание триацилглицеролов (ТАГ), общего холестерола (ХС) и желчных кислот (ЖК) в сыворотке крови хомяков с хронической гиперлипидемией, вызванной атерогенной диетой (Me (Q1-Q3), р).

Таблица 9 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана, холестирамина, розувастатина и эзетимиба на содержание холестерола в липопротеинах низкой плотности (ХС-ЛПНП) холестерола в липопротеинах высокой плотности (ХС-ЛПВП) и значение индекса атерогенности (ИА) в сыворотке крови хомяков с хронической гиперлипидемией, вызванной атерогенной диетой (Me (Q1-Q3), р).

Таблица 10 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана, холестирамина, розувастатина и эзетимиба на содержание триацилглицеролов (ТАГ) и холестерола (ХС) в печени хомяков с хронической гиперлипидемией, вызванной атерогенной диетой (Me (Q1-Q3), p).

Таблица 11 - Связывание желчных кислот (ЖК) и связывающая способность L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана и холестирамина in vitro (Me (Q₁-Q₃)).

Таблица 12 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана и холестирамина на скорость секреции желчи и содержания в ней желчных кислот (ЖК) при модели атерогенной диеты у крыс (Me (Q₁-Q₃), р).

Таблица 13 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-гагактуронана и холестирамина на содержание желчных кислот при модели атерогенной диеты у крыс (Me (Q1-Q3), р).

Таблица 14 - Влияние L-рамнопиранозил-6-O-метил-D-галактуронана и холестерамина на величину экспрессии мРНК генов 7α-гидроксилазы (Cyp)7a1) и рецептора к липопротеинам низкой плотности (Ldlr) в печени крыс на модели хронической гиперлипидемии, индуцированной диетой с высоким содержанием холестерола и жира (Me(Q₁-Q₃), р).

Таблица 15 - Влияние L-рамнопиранозил-6-О-метил-D-галактуронана, холестирамина, розувастатина и эзетимиба на содержание желчных кислот (ЖК) в фекалиях хомяков с хронической гиперлипидемией, вызванной атерогенной диетой под (Me (Q₁-Q₃), р).