[1]Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к рыбоводству, и может быть использовано для кормления рыб.
[2]Известно пробиотические лекарственное средство, которое позволяет нормализовать микробиоценоз кишечника животных (RU 2326692, A61K 39/116, A61P 1/00, A61P 3/00, 2008 г.). Средство содержит смесь суспензий штаммов бактерий: Azomonas agilisc B-2586, Azotobacter chroococcum B-3162, Azotobacter vinelandii B-2587, Bacillus subtilis B-5225, Bacillus subtilis B-4828, Bifidum bacterium globosum B-2584, Escherichia coli B-4412, Enterococcus faecium B-2898, Lactobacillus acidophilus B-3488, Lactobacillus acidophilus B-2585, Propionibacterium freudenreichii B-6561, Pseudomonas sp. B-3908, Pseudomonas sp. B-2589, Saccharomyces cerevisiae Y-365.
[3]Недостатком добавки является ее ограниченная область применения, так как используется только для сельскохозяйственных животных и птиц.
[4]Известны штаммы бактерий Bacillus subtilis и Bacillus amyloliquefaciens (RU 2482174, C12N 1/20, A01N 63/00, А61К 35/74, C12R 1/125, 2013 г.) обеспечивающие восстановление микробиоценозов желудочно-кишечного тракта животных.
[5]Недостатком данного способа является ее ограниченная область применения, так как используется только для сельскохозяйственных животных и птиц.
[6]Известен способ снижения грамположительной микрофлоры в кишечнике (RU 2755817, A61K 31/60, A61K 31/365, A23K 20/00, 2021 г.) который предусматривает совместное использование 4-гидрокси-3-метоксибензойной кислоты 97% в дозировке 0,13 г/кг живой массы и гаммаокталактона в дозировке 0,1 мл/кг живой массы.
[7]Недостатком данного способа является ее ограниченная область применения, так как используется только для цыплят-бройлеров.
[8]Известен способ вскармливания (RU 2777285, A23K 50/75, 2022 г.), который предусматривает введение в рацион в количестве 0,15 г/кг комбикорма корректирующую фитобиотическую капсулированную кормовую добавку «Активо», содержащая в своем составе в качестве действующих веществ смесь эфирных масел из экстрактов растений тимьяна (Thymus vulgaris), розмарина (Rosmarinus officinalis), орегано (Origanum vulgaris), экстракт перца Чили, а также наполнитель - гидрогенизированные растительные жиры.
[9]Недостатком данного способа является ее ограниченная область применения, так как используется только для цыплят-бройлеров.
[10]Известна кормовая добавка для улучшения состояния здоровья с фитопробиотической активностью на минеральной основе (RU 2574689, A23K 1/16, 2016 г.), которая состоит из бактерий штамма Enterococcus faecium, растительного сырья и наполнителя (диатомит в виде обожженной крошки). В качестве растительного сырья используют смесь эфирных масел эвкалипта, чабреца, чеснока и лимона, взятых при соотношении 1:2:1:2, соответственно, и нанесенную на диатомит в виде обожженной крошки с получением сухого концентрата смеси эфирных масел эвкалипта, чабреца, чеснока и лимона в виде порошка.
[11]Недостатком кормовой добавки является ее ограниченная область применения, так как используется только для сельскохозяйственных животных и птиц.
[12]Известен способ выращивания (RU 2771642, A23K 10/16, A23K 50/75, 2022), который предусматривает включение в основной рацион кормовой добавки ГербаСтор, содержащая молочнокислые микроорганизмы, продукты их метаболизма (ферменты, органические кислоты, витамины), жом свекловичный ферментированный, автолизаты дрожжей, минеральные соли, углеводы, фитодобавки, в количестве 0,5 г/кг комбикорма, при этом добавку смешивают с комбикормом перед кормлением.
[13]Недостатком данного способа является ее ограниченная область применения, так как используется только для птицы.
[14]Известен способ повышения продуктивности (RU 2795853, A23K 10/30, A23K 50/75, 2023 г.), который характеризуется тем, что совместно с основным рационом скармливают Бутитан в дозировке 0,5 г/кг корма и Ореганум в дозировке 0,4 г/кг корма.
[15]Недостатком данного способа является ее ограниченная область применения, так как используется только для птицы.
[16]Технический результат - повышение продуктивности и резистентности организма рыб.
[17]Поставленная задача решается путем скармливания комбикорма, тонкий слой которого опрыскивают растворенным в дистиллированной воде фитобиотической добавкой «Интебио» (ООО «БИОТРОФ», Россия) в дозировке 0,5 г/кг корма.
[18]Для осуществления способа проведен эксперимент в условиях кафедры биотехнологии животного сырья и аквакультуры Оренбургского государственного университета, в рамках которого было сформированы 2 группы молоди карпа (n=30): контрольная группа получала основной рацион (ОР), опытная - ОР + «Интебио».
[19]В качестве ОР использовался сбалансированный по основным питательным веществам корм для карповых рыб КРК-110-1 (ОАО «Оренбургский комбикормовый завод», г. Оренбург), содержащий 26,0% протеина.
[20]Экспериментальные исследования и обслуживание рыб выполнены в соответствии с инструкциями Russian Regulations, 1987 (Order No.755 on 12.08.1977 the USSR Ministry of Health) и «The Guide for Care and Use of Laboratory Animals (National Academy Press Washington, D.С. 1966)». При выполнении исследований были приняты усилия, чтобы свести к минимуму страдания животных и уменьшения количества используемых образцов.
[21]Суточная норма кормления определялась еженедельно с учетом массы рыбы, температуры воды и концентрации растворенного в воде кислорода (Пономарев С.В. Индустриальное рыбоводство: учебник / С.В. Пономарев, Ю.Н. Грозеску, А.А. Бахарева. - Санкт-Петербург: Лань, 2013. - 448 с.).
[22]Полученные в ходе эксперимента результаты были статистически обработаны с использованием программного пакета Statistica 10.0. Достоверность различий сравниваемых показателей определяли по t-критерию Стьюдента. Уровень значимой разницы был установлен на P≤0,05.
[23]Экспериментальные исследования показали, что введение в рацион «Интебио» сопряжено с повышением продуктивности массы рыбы: на 1-3 неделях эксперимента масса рыбы была выше контрольных значений на 4-5,9%, на 4-6 неделях - на 10,5-12,4% (P≤0,05), на 7-8 неделях - на 8,8-8,9 % (P≤0,05). Относительный прирост за весь период выращивания в опытной группе составил 246%, а в контрольной группе 218% (табл. 1). При этом показатели абсолютного прироста и абсолютная скорость роста опытной группы превышали контрольные значения.
[24]| Таблица 1 - Рыбоводно-биологические показатели выращивания рыбы |
| Показатели | Группа |
| Контрольная | Опытная |
| Масса рыбы в начале опыта, г | 15,0±1,2 | 15,0±1,1 |
| Масса рыбы в конце опыта, г | 47,7±4,7 | 51,9±4,8* |
| Абсолютный прирост, г | 32,7 | 36,9 |
| Абсолютная скорость роста, г/сутки | 0,58 | 0,66 |
| Относительный прирост, % | 218 | 246 |
| Сохранность, % | 100 | 100 |
| Период выращивания, сутки | 56 |
| Примечание: * Р≤0,05 |
[25]Для определения биологического разнообразия микробиома в конце эксперимента исследовали гомогенизированные образцы кишечника рыб. Идентификацию проводили по средству выделения ДНК с использованием набор реагентов QIAamp® DNA Mini Kit. Результаты были обработаны с использованием пакета программ Microsoft Excel. Проверка соответствия полученных данных нормальному закону распределения определялась при помощи критерия согласия Колмогорова.
[26]Анализ микробиома кишечника рыб исследуемых групп показал более высокое количество таксонов в опытной группе (табл. 2), что говорит о высокой биологической активности микробиома рыб на фоне действия фитобиотической добавки «Интебио». Кроме того, более высокое количество таксонов в опытной группе указывает на высокую устойчивость рыб к стрессу и заболеваниям, так как микробиом кишечника является важным показателем резистентности рыб и как следствие напрямую влияет на продуктивность рыбы.
[27]| Таблица 2 - Количество таксонов, идентифицированных в микробиоме кишечника рыб |
| Группа | Таксоны |
| Филум | Класс | Семейство | Род |
| Контрольная | 6 | 13 | 37 | 42 |
| Опытная | 9 | 17 | 38 | 42 |
[28]Включение в рационе рыб фитобиотической добавки «Интебио» приводило к снижению числа бактерий филумов Actinobacteria на 22,2%, Firmicutes на 12,8 % и Bacteroidetes на 10,7% (фиг. 1), высокое содержание которых может привести к снижению резистентности организма рыб (Oanh N.C., Lam T.Q., Tien N.D., Hornick J.L., Ton V.D. Effects of medicinal plants mixture on growth performance, nutrient digestibility, blood profiles, and fecal microbiota in growing pigs // Vet World. - 2021. - Vol. 14(7). - P. 1894-1900. doi:10.14202/vetworld.2021.1894-1900). На фиг. 1 приведен график, показывающий разницу кишечной микробиоты опытной группы по сравнению с контрольной в %.
[29]Анализируя полученные данные, можно сделать следующие выводы:
[30]- включение в основной рацион фитобиотической добавки «Интебио» в количестве 0,5 г/кг корма положительно влияет на рост и микробиом кишечника рыбы.
[31]- способ повышения продуктивности и резистентности организма рыб путем включения в рацион фитобиотической добавки «Интебио» в количестве 0,5 г/кг корма подтвержден возможностью его осуществления с помощью описанных в заявке средств и методов.
[32]- заявленное изобретение соответствует условию «промышленная применимость».
