[1]Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса замещенных терфенилов, а именно к (Z)-1,2-ди([1,1':3',1''-терфенил]-5'-ил)диазен-1-оксиду 1 формулы:
[2]
[3]Соединение 1 обладает антибактериальной активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве лекарственного средства с антибактериальными свойствами.
[4]Аналогами по структуре заявляемому соединению является 2-((Е)-(бензо[d][1,3]диоксол-5-илимино)метил)-4-((E)-(3-бромфенил)диазенил)фенол 2, обладающий антибактериальной активностью в отношении грамположительных микроорганизмов [Synthetic Communications 2021, 51, 2984-2990, doi: 10.1080/00397911.2021.1958230], формулы:
[5]
[6]Эталоном сравнения был выбран фенилсалицилат формулы:
[7]
[8]который широко применяется в лечебной практике, и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд., перераб., испр. и доп .- М.: Новая волна, 2012. - с. 950].
[9]Задачей изобретения является поиск в ряду замещенных терфенилов веществ с выраженным антибактериальным действием и низкой токсичностью. Поставленная задача достигается получением (Z)-1,2-ди([1,1':3',1''-терфенил]-5'-ил)диазен-1-оксида, который обладает антибактериальной активностью.
[10]Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием N-бензил-[1,1':3',1''-терфенил]-5'-амина с мета-хлорпероксибензойной кислотой в дихлорметане с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:
[11]
[12]Пример 1. Получение соединения 1. К раствору N-бензил-[1,1':3',1''-терфенил]-5'-амина (136 мг, 0.4 ммоль) в дихлорметане (5 мл), охлажденному до 0°С, добавляют мета-хлорпероксибензойную кислоту (70-77% содержание по массе, 205 мг, 0.88 ммоль, 2.2 эквивалента) порционно при перемешивании. Полученную массу перемешивают при комнатной температуре в течение 72 часов, после чего выливают в водный раствор гидроксида натрия (5% по массе, 50 мл), экстрагируют дихлорметаном (2×20 мл), промывают водой (2×10 мл), насыщенным раствором хлорида натрия (15 мл), сушат органическую фазу над безводным сульфатом натрия и концентрируют. Остаток после концентрирования подвергают колоночной хроматографии с использованием силикагеля в качестве сорбента, элюент - петролейный эфир/дихлорметан, для очистки соединения 1. Выход 81% (162 мг). Спектр ЯМР1H (400 МГц, CDCl3) δ, м.д.: 8.58 (д,4J=1.5 Гц, 2Н), 8.46 (д,4J=1.5 Гц, 2Н), 8.02 (т,4J=1.5 Гц, 1H), 7.88 (т,4J=1.5 Гц, 1H), 7.76-7.73 (м, 8Н), 7.54-7.48 (м, 8Н), 7.46-7.39 (м, 4Н). Спектр ЯМР13С (100 МГц, CDCl3), δ, м.д.: 149.6, 145.1, 143.0 (2С), 142.5 (2С), 140.7 (2С), 140.0 (2С), 129.24,129.20 (4С), 129.0 (4С), 128.3 (2С), 127.9 (2С), 127.5 (8С), 127.4, 123.3 (2С), 120.0 (2С). Полученное соединение 1 представляет собой желтое масло, растворимое в хлороформе, толуоле, ацетоне, не растворимое в воде.
[13]
[14]Пример 2. Для характеристики антибактериальной активности использовали стандартные параметры: минимальная подавляющая концентрация (МПК), которую определяли модифицированным методом двукратных серийных разведений (МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам) и минимальная бактерицидная концентрация (МБК) (Медицинские лабораторные технологии: Руководство по клинической лабораторной диагностике, п/р Каприщенко, 2013, Т. 2, стр. 407). Тесты проводили с использованием культур модельных микроорганизмов Escherichia coli МС4100 и Staphylococcus epidermidis АТСС29887 на питательной среде Луриа-Бертани в 96-луночных полистироловых планшетах. Конечная концентрация микроорганизмов в лунках составляла 5*105 КОЕ/мл. Культивирование проводили при 37°С без перемешивания. Определение МПК и высевы для определения МБК производили через 24 ч. На первом этапе исследуемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО), дальнейшие разведения производили в метаноле. В качестве начальных в тестах использовали концентрации, которые при внесении в питательную среду Луриа-Бертани не образовывали осадка (от 0,2 до 4 мг/мл).
[15]Пример 3. Острую токсичность (ЛД50, мг/мл) соединения 1 определяли по методу Г.Н. Першина [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С. 100, 109-117 (1971)]. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи и наблюдали за поведением и гибелью животных в течение 10 суток. Для исследуемого соединения 1 ЛД50 составляет >1500 мг/кг.
[16]Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к V классу практически нетоксичных препаратов [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977. - с. 196]. Результаты испытаний представлены в таблице:
[17]
[18]Как видно из таблицы, заявляемое соединение 1 превышает по антибактериальной активности препарат сравнения (Фенилсалицилат) в 10 раз по отношению к St. epidermidis. (Z)-1,2-ди([1,1':3',1''-терфенил]-5'-ил)диазен-1-оксид 1 проявляет более высокую активность по сравнению с эталоном сравнения в отношении грамположительных микроорганизмов, что делает возможным его использование для создания новых лекарственных средств, антибактериального действия.
