[1]Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано при лечении термического, химического поражения роговицы и конъюнктивы, послеоперационного отека роговицы после факоэмульсификации катаракты, травматических эрозий роговицы, а также для повышения регенерации роговицы.
[2]В лечении и профилактике заболеваний глаз используют различные методы введения лекарственных веществ в ткани глаза. Наиболее широкое применение нашли глазные капли, мази, гели, подконъюнктивальные, парабульбарные и внутрикамерные инъекции. Инсталляционная методика имеет ряд недостатков, такие как частые закапывания в зависимости от выраженности заболевания, закапывание антибиотиков не сопровождается достижением во влаге передней камеры глаза необходимой концентрации для подавления роста микроорганизмов [Барри П., Руководство ESCRS по профилактике и лечению эндофтальмита после операции по удалению катаракты: данные, дилеммы и выводы / П. Барри, Кордовес Л., Гарднер С.; пер. с анг. Б.Э. Малюгина. Temple house, Ирландия 2013. - 30 с.]. Эффективность лечения часто зависит от состава лекарства, а также от лекарственной формы. При повреждении структуры роговицы декспантенол активирует митоз эпителиальных клеток и ускоряет их миграцию в зону раневого дефекта. Кроме того, декспантенол предотвращает образование рубцов стромы роговицы, влияя на формирование нормальной структуры фибробластов и активизируя их пролиферацию. При использовании декспантенола в регенерированных участках происходит восстановление правильной многослойной структуры коллагеновых волокон, что положительно сказывается на восстановлении прозрачности роговицы [Ventura А.С., Walti R., Bohnke M. Corneal thickness and endothelial density before and after cataract surgery // Br. J. Ophthalmol. 2001. Vol. 85. №1. P. 18-20].
[3]Пленки - твердая дозированная лекарственная форма, представляющая собой одно или многослойные тонкие пластинки подходящего для применения размера, содержащие одно или несколько действующих веществ и вспомогательные, в том числе пленкообразующие, вещества. Пленки как лекарственная форма впервые появились в 1970 году в офтальмологии. Глазные лекарственные пленки (ГЛП) имеют пролонгированное действие, что позволяет поддерживать необходимую концентрацию лекарства в лечебной зоне длительное время, применяются один раз в сутки, их применение исключает частые лечебные процедуры, тем самым освобождая медицинский персонал. Вследствие постепенного выделения действующего вещества ГЛП легко переносятся пациентами, имеют минимальные побочные и токсичные действия [Майчук Ю.Ф. Глазные лекарственные пленки / Ю.Ф Майчук, В.И. Поздняков, Г.Л. Хромов, Е.Б. Конева, Л.Н. Старукова // Вестник офтальмологии. - 1974. - №6. - стр. 419-423]. Заболевания роговицы и травматические повреждения, как одни из важных причин снижения зрения, - представляют собой актуальную проблему в офтальмологии и ставят задачу поиска новых форм лекарственных средств для лечения патологий органа зрения [Waring G.O. 3rd, Bourne W.M., Edelhauser H.F. et al. The corneal endothelium. Normal and pathologic structure and function // Ophthalmology. 1982. Vol.89. №6. P. 531-590.].
[4]Известна глазная лекарственная пленка, содержащая следующее соотношение компонентов, мас. %: поливиниловый спирт 82,5, арабиногалактан - 16,5 и левофлоксацин - 1 [патент RU 2404779, 2010 г.].
[5]Известна глазная пленка, содержащая поливиниловый спирт, дигидрокверцетин в качестве активного вещества растительного происхождения, моксифлоксацин в качестве антибиотика. Глазные лекарственные пленки с моксифлоксацином удобны в применении, обладают продолжительным антимикробным, антиоксидантным, иммуномодулирующим, противовоспалительным свойствами [патент RU 2581025, 2016 г.].
[6]Наиболее близким аналогом изобретения является глазная пленка, которая содержит измельченную нативную роговицу глаз крупного рогатого скота 0,25 г, поливиниловый спирт 99,25 г, гамма-глобулин 0,25 г, гентамицин 0,25 г. Глазная пленка может быть использована при лечении травматических ожоговых и дистрофических повреждений роговой оболочки и конъюнктивы [патент RU 2173178, 2001 г.]. Недостатками данной пленки являются сложность химического состава и трудоемкий затратный технологический процесс ее получения, кроме этого, эффективность данной пленки не проверена при химических ожогах роговицы.
[7]Задачей предлагаемого изобретения является расширение арсенала лекарственных средств для лечения патологий роговицы.
[8]Технический результат при использовании изобретения - повышение регенерации роговичной ткани
[9]Заявляемая ГЛП содержит в качестве пленкообразующей основы поливиниловый спирт, а в качестве биологически активного вещества содержит метилурацил при следующем содержании компонентов, в г на 100,0 мл очищенной воды:
[10]поливиниловый спирт - 3,3
[12]Метилурацил (2,4-диоксо-6-метил-1,2,3,4-тетрагидропиримидин) - это препарат, улучшающий трофику, усиливающий рост и размножение клеток, стимулирует процесс регенерации в поврежденных тканях, обладает противовоспалительным действием, ускоряет заживление ран, ожогов, повышает сопротивляемость организма к инфекциям.
[13]Изобретение иллюстрируется фигурами 1-5, на которых представлены гистологические препараты глаз экспериментальных кроликов №№1-4, которые окрашены гематоксилин-эозином и исследованы методом световой микроскопии.
[14]Предлагаемую глазную пленку получают следующим образом. На первом этапе технологии приготовления ГЛП подготавливали помещения и вспомогательные вещества, получали в асептических условиях водный раствор метилурацила.
[15]Глазные лекарственные пленки с метилурацилом получали следующим образом: в асептических условиях в герметично закрывающуюся емкость помещали поливиниловый спирт и заливали заранее приготовленным водным раствором метилурацила. Оставляли при комнатной температуре в течение 12 часов для полного набухания поливинилового спирта. Затем раствор полимера термостатировали при температуре 80-90°С до его полного растворения. Полученный раствор фильтровали через стерилизующий фильтр и разливали в простерилизованные формы с ячейками стерильной пипеткой. Подложку с ячейками помещали в термостат и высушивали в температуре 45°С до остаточной влажности 5%. Полученные пленки вынимали из ячеек и помещали в стерильные флаконы по 10 мл и герметично укупоривали под обкатку.
[16]Известно, что метилурацил стимулирует защитную активность фагоцитов [патент РФ 2485118] и обладает антиоксидантным эффектом, противомикробной активностью [Мещерякова С.А., Катаев В.А., Фаттахова И.Я. и др.). Синтез и противомикробная активность ацетанилидов и ацетилгидразонов тиетанилпиримидин-2,4(1H,3H)-дионового ряда // Химико-фармацевтический журнал, 2015. - Т. 49. №9. - С .28-31].
[17]Для экспериментальной проверки заявляемого средства были приготовлены образцы пленок, с использованием следующих пленкообразователей: поливиниловый спирт (ПВС), поливинилпирролидон (ПВП), метилцеллюлоза (МЦ), натрий карбоксиметилцеллюлоза (Na-КМЦ), желатин. В качестве пластификатора во все составы, кроме состава с ПВС, вводили глицерин (таблица 1). Полимеры заливаются водой (может быть нагревание, в зависимости от свойств полимера). Масса тщательно перемешивается ручной или механической мешалкой. Смесь выдерживается при комнатной температуре и периодическом перемешивании до полного растворения полимера, затем добавляется глицерин, проводится дополнительное смешивание. Критериями для отбора наиболее подходящего состава пленок служили следующие показатели качества: органолептические свойства, рН водного раствора, толщина, влажность, время растворения. Результаты исследования показателей качества пленок различного состава представлены в таблице 2.
[18]Все растворы пленок имеют нейтральную реакцию. На основании анализа всех показателей выбрали пленки состава №1 с пленкообразователем ПВС. У данного состава по сравнению с другими составами оптимальные органолептические показатели, влажность, толщина и время растворения (пролонгирование).
[19]Готовая лекарственная пленка бесцветная, прозрачная, обладает высокой эластичностью и хорошей адгезией. ГЛП удобна в применении, хорошо совместима с глазной жидкостью, что способствует постепенному высвобождению действующего вещества, обеспечивая пролонгированное действие. Пленку рекомендуется хранить защищенном от света месте, при температуре от 8 до 15°С.
[20]Предлагаемая ГЛП закладывается в конъюнктивальную полость 1 раз в день в течение 7-21 дней.
[21]Применение ГЛП улучшает функциональные исходы, сокращает сроки лечения, пленка хорошо переносится, экономична и удобна в использовании. Показателем клинического выздоровления считается восстановление эпителиально-стромального пласта роговицы.
[22]Предлагаемая ГЛП апробирована на переносимость тканями глаза в эксперименте на 5 кроликах породы шиншилла. Экспериментально вызвали химический ожог роговицы (по методу Обенбергера) аппликацией диска фильтровальной бумаги диаметром 8 мм, смоченной 3% уксусной кислотой, экспозицией 5 секунд. Затем промывали конъюнктивальную полость 0,9% физиологическим раствором в течение 10 минут. После этого в левые глаза кроликов №№1, 2, 3, 4 (4 глаза) закладывали ГЛП с метилурацилом 1 раз в день весь период эксперимента. В левый глаз кролика №5 закладывали гель декспантенола 5% (корнерегель) 2 раза в день, а правый глаз оставляли без лечения для наблюдения в условиях отсутствии лечения. Для профилактики бактериальной инфекции всем кроликам закапывали глазные капли тобрамицин 0,3% 4 раза в день. Терапевтическую эффективность лечения оценивали по следующим признакам: рассасывания отека роговицы, уменьшения светобоязни, инъекции, раздражения и отека конъюнктивы, уменьшения сроков лечения.
[23]Гистологическая картина роговицы кролика на вторые сутки наблюдения: в центральной зоне роговицы выявлялась тотальная десквамация эпителия от основного вещества роговицы, повреждение Боуменова мембраны. Эпителиоциты на периферии роговицы определялись как клетки с гиперхромными уплощенными ядрами и располагались в один ряд. Строма отечная, воспалительно-клеточная инфильтрация отсутствовала (фиг. 1).
[24]На 7-е сутки наблюдения после кислотного ожога очагов эрозии не выявлены и наблюдается тотальная эпителизация роговицы. Передний эпителий характеризовался неравномерностью и неоднородностью толщины пласта. Наряду с однорядным камбиальным эпителием призматической формы обнаруживались пласты уплощенных эпителиоцитов, вектор которых был направлен вдоль длинной оси поверхности роговицы. Направление миграции было от периферии (от лимба) к центру, т.е. центростремительно (фиг. 2). Это свидетельствует о миграции эпителиоцитов со стороны лимба для замещения утраченного переднего эпителия.
[25]В центральной зоне спустя 14 суток определялся многослойный плоский неороговевающий эпителий в виде 5-6 клеточных слоев, визуализируется центростремительная эпителизация дефекта роговицы (фиг. 3). В этом же сроке наблюдения в перилимбальной зоне определялись слои эпителиальных клеток с миелиновыми гранулами, что свидетельствует о нормальном процессе эпителизации роговицы (фиг. 4).
[26]На гистологической картине на 21-е сутки исследования наблюдалось 6-7 слоев эпителия, восстановление многослойного плоского неороговевающего эпителия в центральной зоне роговицы (фиг. 5).
[27]В контрольном левом глазу 5-го кролика тоже наблюдались вышеперечисленные изменения, за исключением некоторых участков, где наблюдалось относительно запоздалое закрытие дефекта, что подтверждается данными экспериментальных работ других авторов [Пронкин И.А. Разработка метода терапии рецидивирующих эпителиальных дефектов роговицы на основе «Протектора эпителия роговицы гелевого»: дис. … канд. мед. наук. - Москва, 2017. - 119 с.]. На глазу с моделью ожога без лечения дефект эпителия сохранялся на 21-е сутки наблюдения.
[28]
[29]
