[1]Изобретение относится к аналитической химии, а именно, к способам определения дротаверина гидрохлорида
и может быть использовано в лабораториях аптечных управлений и
биохимических лабораториях при исследовании фармакокинетики данного препарата .
Известен способ спектрофотометри ческого количественного определения
дротаверина гидрохлррида, основанный на измерении адсорбции при различных длинах волн в ультрафиолетовой
области (360, 305 и 275 нм) fj . Недостаток способа состоит в . его невысокой чувствительностии- не
селективности . Цель изобретения - повышение чув ствительности и селективности способа
. Указанная цель достигается описываемым способом количественного
определения дротаверина гидрохлорида , заключающимся в обработке анали
зируемой пробы раствором пермангана та калия в присутствии концентрированной серной кислоты и перекиси
водорода с последующим измерением флуоресценции полученного раствора. Максимум возбуждения флуоресценции соединения, полученного в результате взаимодействия дротаверина
гидрохлорида с перманганатом калия в кислой среде в области от 320 до
420 нм, а максимум флуоресценции при 471 нм в области от 400 до 550нм.
Линейная зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации
дротаверина гидрохлорида лежит: в об-. ласти от 0,01 до 20 мкг/мл (табл. 1).
При содержании 2 мкг/мл в моче и крови открывается полностью (100%), т.е. компоненты крови и мочи не
влияют на интенсивность флуоресценции . В лекарственных формах,, в состав
которых входит дротаверин гидрохлорида , сопутствующие ингредиенты (наполнители) также не влияют
на интенсивность флуоресценции. Пример. Определение 2%-ного раствора дротаверина гидрохлорида
в лекарственной форме. 0,5 мл 2%-ного раствора исследуемого вещества переносят в мерную
колбу на 100 мп доводят дистиллированной водой до метки и тщательно
перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мл дистиллированной
воды , 1 мл концентрированно серной кислоты, 2 капли 3%-ного раотвора перманганата калия, энергично
встряхивают и через 1 мин добавляют 1 каплю 3%-ного раствора перекиси водорода, перемешивают
и измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора.
[2]Содержание дротаверина гидрохлорида определяют по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют
0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 0,8 мл стандартного водного раствора дротаверина гидрохлорнда с содержанием
10 мкг/мл, доводят все растворы до 9 мл дистиллированной водой, прибавляют 1 мл концентрированной серной
кислоты, 2 капли 3%-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают
, через 1 мин добавляют 1 каплю 3%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют.одновременно
с растворами исследуемых образцов . По результатам этих измерений строят калибровочный график.
[3]Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида
представлены в табл. 2. На каждое , определение взято 0,5 мл 2%-ного ратвора дротаверина гидрохлорида.
[4]П р и м е р 2. Определение дротаверина гидрохлорида в таблетках по 0,04 г.
[5]Точную навеску (0,05 г) мелкоизмельченной таблетки помещают в мерную колбу емкостью 200 мл, прибавляют
50 мл дистиллированной воды и энергично встряхивают 23 мин, доводят объем колбы водой до
метки. Тщательно перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мл дистиллированной воды,
1 мл концентрированной серной кислоты , 2 капли 3%-ного раствора перманганата
калия, энергично встряхивают и через 1 мин .прибавляют 2 капли 3%-ного раствора перекиси водорода
, измеряют интенсивность флуоресценцйи .
[6]Содержание дротаверина гидрохлорида
рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7
и 0,8 мл стандартного водного раствора дротаверина гидрохлорида с содержанием 10 мкг/мл, доводят все
ражтворы до 9 мл дистиллированной водой, прибавляют 1 мл концентриро аннрй серной кислоты, 2 капли
3%-ного раствора перманганата калия , энергично встряхивают, через 1 мин добавляют 1 каплю 3%-ного
раствора перекиси водорода и флуориметрируют одновременно с растворами
исследуемых образцов. По результатам этих измерений строят Калибровочный график.
[7]Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида
в таблетках по 0,04 г представлены в табл. 3.
[8]Примерз, Определение дротаверина
гидрохлорида в таблетках в никошпане (0,078 г дротаверина гидрохлорида к 0,022 г никотиновой
кислоты).
[9]Точную навеску (0,05 г) мелко измельченной таблетки помешают в
мерную колбу емкостью 200 мл, прибавляют 50 мл дистиллированной воды и энергично встряхивают 2-3 мин
объем колбы доводят водой до метки Тщательно перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мл
дистиллированной воды, 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли
3%-ного раствора перманганата калия , энергично встряхивают и через
1 мин измеряют интенсивность флуоресценции , предварительно разбавив
полученный раствор до 20 мл и взяз на анализ 10 мл.
[10]Содержание дротаверина гидрохлорида рассчитывают по калибровочному
графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,2, 0,.3, 0,5, 0,7 и
0,8 мл стандартного раствора (водного ) дротаверина гидрохлорида с содержанием 10 мкг/мл, доводят все
растворы до 9 мл дистиллированнойводой , прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли
3%-ного раствора перманганата калия энергично встряхивают и через 1 мин
добавляют 1 каплю 3%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют
одновременно с растворами исследуемых образцов..
[11]По результатам этих измерений
строят калибровочный график. Результаты количественного определения
дротаверина гидрохлорида в .таблетках , никошпан представлены в табл.4.
[12]П р и м е р 4. Определение дротаверина гидрохлорида в моче.
[13]К 5 мл мочи прибавляют 5 мл фосфатного буферного раствора(рН 10 затем прибавляют 5 мл хлороформа
и энергично встряхивают в течение 5 мин. После расслаивания хлороформный слой сливают в выпарительную
чашку. Экстракцию повторяют. 5 мл хлороформа сливают в выпарительную чашку и выпаривают на водяной
бане. К осадку прибавляют 9 мл дистиллированной воды, через 1 мин прибавляют 1 .мл концентрированной
серной кислоты, перемешивают, прибавляют 5 капель 3%--ного раствора
перманганата калия и перемешивают. Через 1 мин прибавляют 1-2 капли
3%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют одновременно со стандартным раствором.
[14]Содержание дротаверина гидрохлорида определяют по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 0,8 мл стандартного раствора (водного
) дротаверина гидрохлорида с содержанием 10 мкг/мл, доводят все растворы до 9 мл дистиллированной
водой, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 5 капель 3%-ного раствора перманганата калия
энергично встряхивают и через 1 мин добавляют 1 каплю 30%-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют
одновременно с ра створом исследуемы образцов.По результатам этих измерений строят калибровочный график.
[15]Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида представлены в табл. 5.
[16]П р и м е р 5. Определение дротаверина гидрохлорида в крови.
[17]К 1 мл плазмы крови прибавляют 5 мл фосфатного буфера (рН 8-8,5) 5 мл изоамилового спирта и встряхивают
10 мин.
[18]Слой изоамилового спирта после. расслоения сливают в выпарительную
[19]чашку. Экстракцию повторяют. 5 мл изоамилозого спирта сливают в выпарительную
чашку и выпаривают на водяной бане. К осадку прибавляют 9 мл
дистиллированной воды, 1 мл концентрированной серной кислоты,.перемешивают и приливают 4 капли
раствора перманганата калия и перемешивают .- Через 1 мин прибавляют 1
каплю 30%-ного раствора перекиси водорода , перемешивают и измеряют ин0 тенсивность флуоресценции полученного раствора.
[20]Содержание дротаверина гидрохлорида
определяют по стандартному рас5 твору, содержащему1, 3, 5 или
10 мкг/мл. Для этого к 9 МП стандартного раствора прибавляют .1 мл концентрированной серной кислоты, 4
капли 3%-ного раствора перманганата калия и перемешивают. Через 1 мин
[21]0
прибавляют 1 каплю 30%-ного раствора перекиси водорода, перемешивают
и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов.
