патент
№ RU 2650628
МПК A61K39/116

Способ получения вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят

Авторы:
Терехов Владимир Иванович
Номер заявки
2017118742
Дата подачи заявки
29.05.2017
Опубликовано
17.04.2018
Страна
RU
Как управлять
интеллектуальной собственностью
Реферат

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят, включающий получение антигенов путем выделения из пораженных органов телят и поросят эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих экзотоксины, гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивание которых проводят раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, после чего их инактивируют формалином до его конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, где после инактивации формалином антигенов осуществляют стерилизующую фильтрацию бульонной культуры Escherichia coli для получения бесклеточной культуральной среды, содержащей токсины Escherichia coli, которую смешивают с культуральными средами, содержащими клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, при следующем соотношении компонентов, мас. %: культуральная среда, содержащая клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis - 26,0-30,0; культуральная среда, содержащая клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis - 26,0-30,0; бесклеточная культуральная среда, содержащая токсины Escherichia coli - остальное. Изобретение позволяет повысить эффективность специфической профилактики колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции у телят и поросят, повысить безопасность и безвредность вакцины. 2 табл., 7 пр.

Формула изобретения

Способ получения вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят, включающий получение антигенов путем выделения из пораженных органов телят и поросят эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих экзотоксины, гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивание которых проводят раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, после чего их инактивируют формалином до его конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, отличающийся тем, что после инактивации формалином антигенов осуществляют стерилизующую фильтрацию бульонной культуры Escherichia coli для получения бесклеточной культуральной среды, содержащей токсины Escherichia coli, которую смешивают с культуральными средами, содержащими клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, при следующем соотношении компонентов, мас. %:

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis26,0-30,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis26,0-30,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

Описание

[1]

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к способам получения вакцин, может быть использовано в учреждениях, занимающихся созданием вакцинных препаратов для профилактики смешанных кишечных инфекций у телят и поросят.

[2]

Установлено, что в последние годы в нозологическом профиле инфекционных заболеваний молодняка крупного рогатого скота и свиней превалируют колибактериоз, стрептококкоз и энтерококковая инфекция (Арбузова А.А. Этиологические аспекты возникновения желудочно-кишечных заболеваний телят раннего постнатального периода / Ученые записки Казанской ГАВМ. - 2010. Т. 200. С. 11-17; Спиридонов А.Г., Махмутов А.Ф. Этиология инфекционных диарей новорожденных поросят и телят / Ветеринарная медицина. 2011. В. 95. С. 264-265; Терехов В.И., Иванов А.В. Видовой состав бактерий, выделенных от поросят при острых кишечных заболеваниях / Ветеринария Кубани, 2011. №3. С. 23-25; Ефанова Л.И., Манжурина О.А., Степанов А.В. Этиологическая структура факторных инфекций свиней и крупного рогатого скота в хозяйствах ЦЧЗ России / Вестник Курской ГСХА, 2012. №12. С. 71-72; Терехов В.И. Этиология и эпизоотология желудочно-кишечных болезней новорожденных телят / Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2012. №1. С. 15). Данные заболевания протекают, как правило, в ассоциации, поэтому применение ассоциированных вакцин, включающих антигены разных возбудителей, является более предпочтительным, чем использование моновакцин, поскольку в этом случае одновременно создается напряженный иммунитет в отношении возбудителей сразу нескольких инфекционных болезней. Кроме того, в связи с вариабельностью и постоянным изменением антигенного состава возбудителей кишечных инфекций у молодняка крупного рогатого скота и свиней применяемые ассоциированные вакцины должны содержать антигены, соответствующие антигенам возбудителей, выделяемых из конкретного эпизоотического очага, либо содержать набор антигенов, общих для большинства основных возбудителей.

[3]

Известна вакцина, ассоциированная против диареи телят (патент РФ на изобретение №2035916 от 17.06.1993, МКИ A61K 39/116), которая содержит смесь микробных суспензий энтеробактерий Escherichia coli 09: K99, Е. coli 0138: K88, Е. coli 200, Salmonella typhimurium 195, S. dublin 196, S. enteritidis 197, Klebsiella pneumoniae 201, 202, Proteus vulgaris 198 и P. mirabilis 199, инактивированных этанолом и депонированных на гидроокиси алюминия. Данная вакцина предназначена для специфической профилактики колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протейной инфекции только у телят, однако она не защищает животных от стрептококковой и энтерококковой инфекций, кроме того, она не предназначена для защиты поросят.

[4]

Известна вакцина, ассоциированная против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиоза поросят (патент РФ на изобретение №2129441 от 10.12.97, МКИ А61К 39/116, К39/08, К39/108). Эта вакцина содержит клостридиозный компонент, представленный антигенами клостридий (суспензией клеток и В-токсином штамма Clostridium perfingens типа С N3), а также сложный эшерихиозный компонент, включающий набор соматических антигенов (078, 0141), белковых адгезивных антигенов (К88, К99, 987Р, F41), полисахаридных капсульных антигенов (К80, К87), термостабильные и термолабильные анатоксины в соотношении 1:1, инактивированные формалином, с добавлением адъюванта - геля гидроокиси алюминия. Данная вакцина обеспечивает широкий спектр иммуногенности против энтеротоксемии и эшерихиоза, но не создает иммунитета против стрептококкоза и энтерококковой инфекции. К тому же она предназначена только для защиты поросят, но не телят.

[5]

Известна вакцина, ассоциированная против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий (патент РФ на изобретение №2316344 от 19.07.2006, МПК А61К 39/112, 116, 108, 09, А61Р 31/04). Данная вакцина в качестве антигенов содержит суспензию клеток чистых культур Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Streptococcus pneumoniae и Streptococcus faecalis, полученных путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии с последующим посевом на дифференциально-диагностические среды. Выделенные чистые культуры раздельно выращивают в мясопептонном бульоне с добавлением глюкозы до концентрации микробных клеток 4-5 млрд в 1 см3 и смешивают в равных соотношениях. Инактивируют формалином до 0,4-0,6%-ной конечной концентрации. Выдерживают при температуре 37°С в течение 72-96 часов. Смешивают культуры в равных соотношениях. Вакцина также содержит формалин, глюкозу, гидроокись алюминия и обладает высокой специфичностью и иммуногенностью. Однако представленная вакцина против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции применима в качестве средства специфической профилактики только для нутрий и не предусматривает использование для профилактики обозначенных инфекций у телят и поросят.

[6]

Известен способ изготовления ассоциированной вакцины против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят (патент РФ на изобретение №2429012 от 20.09.2011, МПК А61К 39/116, 108, 09 - прототип), согласно которому вакцина, ассоциированная против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят, включает получение антигенов и инактивацию их формалином, при этом предварительно проводят выделение из пораженных органов телят и поросят эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus fecalis, раздельно их выращивают на питательном бульоне при температуре 37°С, при этом культуры Escherichia coli в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus fecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных тел в 1 мл, раздельно инактивируют формалином до концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, после чего смешивают культуры в равных объемах, фасуют и укупоривают.

[7]

Недостатком известного способа является то, что в полученной вакцине содержится большое количество балластных клеток Escherichia coli, несущих лишнюю антигенную нагрузку, что негативно сказывается на формировании у животных иммунной защиты против токсинов кишечной палочки, стрептококков и энтерококков, кроме того, данная вакцина может быть реактогенна.

[8]

Техническим результатом изобретения является повышение эффективности специфической профилактики колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции у телят и поросят, повышение безопасности и безвредности вакцины.

[9]

Технический результат достигается тем, что в способе получения вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят, включающем получение антигенов путем выделения из пораженных органов телят и поросят эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивание которых проводят раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, затем их инактивируют формалином до его конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, согласно изобретению после инактивации формалином антигенов осуществляют стерилизующую фильтрацию бульонной культуры Escherichia coli для получения бесклеточной культуральной среды, содержащей токсины Escherichia coli, которую смешивают с культуральными средами, содержащими клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, при следующем соотношении компонентов, мас. %:

[10]

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis26,0-30,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis26,0-30,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

[11]

Новизна технического решения заключается в том, что за счет использования бесклеточных культур эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитических штаммов Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, инактивированных формалином, обеспечивается повышение эффективности профилактики кишечных инфекций у телят и поросят, а также безвредность биопрепарата за счет отсутствия после применения поствакцинальных реакций.

[12]

В патентной и научно-технической литературе не обнаружена аналогичная заявляемой совокупность признаков, что позволяет судить об изобретательском уровне заявляемого предложения.

[13]

Предложенный способ получения вакцины соответствует критерию «промышленная применимость», поскольку легко воспроизводим, не требует сложного технологического оборудования и условий.

[14]

Способ получения вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции осуществляют следующим образом.

[15]

Первоначально среди эпизоотических штаммов Escherichia coli, изолированных от павших телят и поросят, проводят отбор тех из них, которые обладают генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов. Для этого можно использовать тест-системы «АмплиСенс E. coli-tox» (Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии МЗ РФ, г. Москва) либо определить наличие токсинообразования с помощью биотеста на инфузориях-стилонихиях (патент РФ на изобретение 2262529 от 20.10.2005, МПК C12N 1/10, C12Q 1/10). А среди эпизоотических штаммов стрептококков и энтерококков отбирают гемолитические варианты Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis. Отобранные штаммы по отдельности засевают в пробирки с 10 мл питательного бульона, в состав которого входят кислотный гидролизат крови (9-11%), аутолизат пекарских дрожжей (9-11%), пептон (0,9-1,1%), натрия хлорид (0,4-0,6%), двузамещенный фосфорнокислый натрий (0,05-0,15%) и калия хлорид (0,01-0,03%) (патент РФ на изобретение 2342425 от 27.12.2008, МПК C12N 1/20, C12Q 1/04), после чего их помещают в термостат и культивируют при 37°С в течение 6-8 ч до появления легкой мути, свидетельствующей о росте микроорганизмов. Затем полученные культуры переносят в колбы с 200-300 мл аналогичного питательного бульона и инкубируют при 37°С: штаммы Escherichia coli в течение 7 дней, а штаммы Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до достижения концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл. Ежедневно 2 раза в сутки колбы встряхивают. По окончании инкубации в культуры добавляют формалин до концентрации 0,3-0,4% и инактивируют в течение 14 суток при температуре 37°С с ежедневным двукратным перемешиванием. После завершения инактивации равные объемы культур Escherichia coli объединяют и с помощью стерилизующей фильтрации отделяют микробную массу от среды культивирования, получая, таким образом, бесклеточную культуральную среду Escherichia coli (колибактериозный антигенный компонент). Далее бесклеточную культуральную среду Escherichia coli и бульонные культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis соединяют при следующем соотношении компонентов, мас. %:

[16]

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis26,0-30,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis26,0-30,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

[17]

Полученную вакцину фасуют по 100 мл в стерильные флаконы, укупоривают и проверяют на стерильность и безвредность. По внешнему виду готовая вакцина представляет собой жидкость светло-коричневого цвета с рыхлым беловато-серым осадком, который при встряхивании легко разбивается в гомогенную взвесь. Срок хранения в сухом и темном помещении при температуре 4-10°С 1 год.

[18]

Полученная вакцина предназначена как для профилактики колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции у телят и поросят, протекающих как в виде мононоинфекций, так и в виде ассоциированных инфекций. Вакцина ареактогенна и безвредна. Вакцину применяют в неблагополучных по кишечным инфекциям телят и поросят хозяйствах.

[19]

Вакциной прививают стельных коров и нетелей дважды подкожно первый раз за 30, а второй раз за 15 дней до отела в дозе 5 и 10 мл соответственно; телят также прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе 1 и 2 мл соответственно.

[20]

Супоросным свиноматкам вакцину вводят внутримышечно дважды, первый раз за 30 дней, а второй раз за 20 дней до опороса в дозе 5 мл; поросят прививают первый раз в возрасте 15-17 дней, а второй в возрасте 28-30 дней в дозе 0,25 и 0,5 мл соответственно.

[21]

Использование вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции позволяет обеспечить защиту телят и поросят сразу от трех опасных инфекционных болезней: колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции, продолжительностью не менее 10 месяцев (срок наблюдения).

[22]

Эффективность вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции зависит от свойств подобранных эпизоотических штаммов Escherichia coli, Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, последовательности приготовления и процентного соотношения компонентов, входящих в ее состав.

[23]

Приведено пять примеров зависимости эффективности вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции телят и поросят от соотношения заявленных компонентов из расчета на 100 мл вакцины и два примера демонстрирующих сравнительную эффективность использования заявляемого изобретения.

[24]

Пример 1

[25]

Берут эпизоотические штаммы Escherichia coli, продуцирующие термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитические штаммы Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивают раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, после чего их инактивируют формалином до конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, отделяют бактериальную массу Escherichia coli с помощью стерилизующей фильтрации, после чего полученные культуры смешивают при следующем соотношении компонентов, мас. %:

[26]

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis24,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis24,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

[27]

При данном соотношении компонентов вакцина обладает слабой протективной активностью и защищает от кишечной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, телят в 77%, а поросят в 70% случаев.

[28]

Пример 2

[29]

Берут эпизоотические штаммы Escherichia coli, продуцирующие термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитические штаммы Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивают раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, после чего их инактивируют формалином до конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, отделяют бактериальную массу Escherichia coli с помощью стерилизующей фильтрации, после чего полученные культуры смешивают при следующем соотношении компонентов, мас. %:

[30]

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis26,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis26,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

[31]

При данном соотношении компонентов вакцина защищает от кишечной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, телят в 88%, а поросят в 84% случаев.

[32]

Пример 3

[33]

Берут эпизоотические штаммы Escherichia coli, продуцирующие термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитические штаммы Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивают раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, после чего их инактивируют формалином до конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, отделяют бактериальную массу Escherichia coli с помощью стерилизующей фильтрации, после чего полученные культуры смешивают при следующем соотношении компонентов, мас. %:

[34]

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis28,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis28,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

[35]

При данном соотношении компонентов вакцина защищает от кишечной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, телят в 93%, а поросят в 88% случаев.

[36]

Пример 4

[37]

Берут эпизоотические штаммы Escherichia coli, продуцирующие термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитические штаммы Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивают раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, после чего их инактивируют формалином до конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, отделяют бактериальную массу Escherichia coli с помощью стерилизующей фильтрации, после чего полученные культуры смешивают при следующем соотношении компонентов, мас. %:

[38]

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis30,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis30,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

[39]

При данном соотношении компонентов вакцина защищает от кишечной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, телят в 96%, а поросят в 92% случаев.

[40]

Пример 5

[41]

Берут эпизоотические штаммы Escherichia coli, продуцирующие термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, гемолитические штаммы Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, выращивают раздельно на питательном бульоне, при этом культуры Escherichia coli выращивают в течение 7 дней, а культуры Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis в течение 24 ч до концентрации 5-6 млрд микробных клеток в 1 мл, после чего их инактивируют формалином до конечной концентрации 0,3-0,4% в течение 14 суток, отделяют бактериальную массу Escherichia coli с помощью стерилизующей фильтрации, после чего полученные культуры смешивают при следующем соотношении компонентов, мас. %:

[42]

Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Streptococcus bovis32,0
Культуральная среда, содержащая
клетки гемолитических штаммов Enterococcus faecalis32,0
Бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coliостальное

[43]

При данном соотношении компонентов вакцина защищает от кишечной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, Streptococcus bovis и Enterococcus faecalis, телят в 89%, а поросят в 82% случаев. На месте введения у отдельных животных, особенно из числа поросят, развились плотные болезненные припухлости.

[44]

Пример 6

[45]

В хозяйстве Краснодарского края, неблагополучном по острым кишечным заболеваниям телят, провели производственное испытание заявляемой вакцины. По данным ветеринарной лаборатории диарею у молодняка крупного рогатого скота в данном хозяйстве вызывают патогенные штаммы кишечной палочки и стрепто- и энтерококки. Эффективность вакцины, изготовленной по заявляемому способу, сравнивали с эффективностью прототипа, для этого было сформировано 3 группы стельных коров по 25 голов в каждой.

[46]

Первую группу коров иммунизировали заявляемой вакциной первый раз за 30 дней до отела в дозе 5 мл, второй раз за 15 дней до отела в дозе 10 мл. Полученных от этих коров телят также иммунизировали заявляемой вакциной первый раз в возрасте 15-20 дней в дозе 1 мл, а второй через 10-15 дней в дозе 2 мл. Вакцину вводили подкожно в область верхней трети шеи.

[47]

Вторую группу коров и полученных от них телят иммунизировали прототипом по схеме и в дозах, аналогичных в первой группе.

[48]

Третья группа коров была контрольной, они и полученные от них телята не иммунизировались.

[49]

Эффективность вакцин оценивали по достижении телятами 3-месячного возраста и перевода их в другой корпус на групповое содержание. Критериями оценки служили показатели заболеваемости и летальности.

[50]

Результаты опыта отражены в таблице, из материалов которой видно, что в первой группе острая кишечная инфекция была зарегистрирована у 2 телят, при этом диарею у них удалось купировать в течение 3 дней, а на 5 день телята полностью выздоровели. Таким образом, профилактическая эффективность заявляемой вакцины составила 92%.

[51]

[52]

Во второй группе острая кишечная инфекция была зарегистрирована у 5 телят, причем у одного теленка она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животного. Профилактическая эффективность прототипа составила 80%.

[53]

В третьей группе из 25 телят заболело 18 животных, из которых 5 пали. Таким образом, в 3 группе заболеваемость составила 72%, а летальность - 27,8%, что свидетельствует о значительной тяжести болезни.

[54]

Следовательно, применение вакцины ассоциированной против колибактериоза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции, полученной по заявляемому способу, позволило более эффективно профилактировать заболевание телят острыми кишечными инфекциями. Заболеваемость телят, привитых заявляемой вакциной, составила 8%, а сохранность 100%, тогда как при использовании прототипа заболеваемость телят составила 20%, а сохранность 96%. В контрольной группе заболеваемость телят острой кишечной инфекцией составила 72%, а сохранность 80%.

[55]

Пример 7. Обоснование эффективности использования вакцины для профилактики острых кишечных заболеваний поросят

[56]

В хозяйстве длительно неблагополучном по острым кишечным заболеваниям поросят сформировали 3 группы супоросных свиноматок по 5 животных в каждой.

[57]

В первой группе (опытная) свиноматок и полученных от них поросят иммунизировали предлагаемой вакциной. Свиноматок иммунизировали первый раз за 30 дней до опороса в дозе 5 мл, второй раз - за 20 дней в дозе 5 мл внутримышечно в область основания ушной раковины. Поросят иммунизировали дважды первый раз в возрасте 15-17 дней в дозе 0,25 мл, а второй в возрасте 28-30 дней в дозе 0,5 дней внутримышечно в области внутренней поверхности бедра.

[58]

Свиноматок второй группы (положительный контроль) вакцинировали вакциной ОКЗ производства ООО «АГРОВЕТ» (г. Москва) согласно инструкции, а именно двукратно за 30 и 40 дней до опороса в дозе 5 мл подкожно. Поросят, полученных от данных свиноматок, вакцинировали первый раз в возрасте 25-27 дней, второй раз в возрасте 35-37 дней подкожно в дозе 1,0 мл.

[59]

В третьей группе (отрицательный контроль) ни свиноматок, ни полученных от них поросят не вакцинировали.

[60]

За поросятами в течение 90 дней вели клиническое наблюдение, учитывали количество заболевших и павших животных. Результаты проведенного исследования представлены в таблице 2. Из материалов таблицы видно, что в 1-й группе от 5 свиноматок было получено 53 поросенка, из которых заболело 8 голов и пало 2. Заболеваемость по группе составила 15,1%, смертность 3,8%. Следовательно, профилактическая эффективность заявляемого способа составила 84,9% при сохранности поросят в группе 96,2%.

[61]

Во 2-й группе, где свиноматки иммунизировались вакциной ОКЗ, родилось 52 поросенка, из которых 17 заболело и 5 пало. Заболеваемость по этой группе составила 32,7%, смертность 9,6%, профилактическая эффективность вакцины ОКЗ 67,3% при сохранности 90,4%.

[62]

В 3-й группе было получено 53 поросенка, из них 28 заболело, 9 пало. Заболеваемость составила 52,8%, смертность 17%, а сохранность 83%.

[63]

[64]

Следовательно, заявляемый способ профилактики острых кишечных заболеваний позволил снизить заболеваемость по сравнению с прототипом на 17,6%, а в сравнении с группой отрицательного контроля на 37,7%, при этом падеж сократился в 2,5-4,5 раз, что свидетельствует о его высокой эффективности.

Как компенсировать расходы
на инновационную разработку
Похожие патенты