[1]
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу получения средства "Настойка эхинацеи пурпурной", обладающего иммуномодулирующими свойствами.
[2]
Известны способы получения лекарственных средств из травы эхинацеи пурпурной [Echinacea purpurea (L.) Moench.] и эхинацеи узколистной (Echinacea angustifolia Moench.) с использованием в качестве
экстрагента 40%, 20-70% (настойка), 55% этилового спирта ("Настойка эхинацеи доктора Тайсса"), а также путем получения сока из свежесобранного сырья с последующим добавлением 20% этилового спирта в
качестве консерванта ("Эхинацин ликвидум", "Иммунал" и др.) [3, 5, 9, 12, 13, 16, 17].
[3]Однако недостатком известных способов является сложность технологического процесса, неполная
экстракция целевых веществ (фенилпропаноиды и полисахариды) и, как следствие, низкий выход целевого продукта, дороговизна получаемых лекарственных средств. Кроме того, все зарубежные аналоги
- дорогостоящие препараты, что значительно ограничивает возможности широкого их применения в медицинской практике. Данное обстоятельство становится особенно важным на фоне растущей потребности
здравоохранения в иммуномодуляторах. Одним из главных факторов этой тенденции является ухудшающаяся экологическая ситуация, приводящая к росту заболеваний с профпатологией и экопатологией, причиной
или следствием которых являются иммунодефицитные состояния. Наличие эффективного отечественного иммуномодулирующего средства, доступного широким слоям населения, могло бы способствовать смягчению
вредного воздействия экологических и других неблагоприятных факторов и, следовательно, оздоровлению населения Российской Федерации.
[4]В настоящее время трава эхинацеи пурпурной [Echinacea
purpurea (L.) Moench.], эхинацеи узколистной (Echinacea angustifolia Moench.) и других видов служит источником получения таких препаратов, как "Эхинацея-Галенофарм", "Эхинацин", "Иммунал" (сок и
таблетки), "Эхинафорс", "Пародонтакс" и др. [5, 7, 10, 13, 16]. С учетом имеющейся сырьевой базы эхинацеи пурпурной в Российской Федерации (плантации в Самарской, Белгородской областях, Краснодарском
крае), а также потребности практического здравоохранения в доступных широким слоя населения растительных иммуномодулирующих препаратах представляется актуальной проблема создания лекарственных средств
на основе сырья данного растения, а также совершенствования способов их получения.
[5]По данным отечественных и немецких ученых [7, 10, 14, 15, 18-22], в траве эхинацеи пурпурной содержатся
три группы биологически активных соединений (БАС) - фенилпропаноиды, в частности цикориевая кислота (1), полисахариды и алкиламиды, обладающие иммуностимулирующим, противовирусным,
противовоспалительным, антимикробным и антибластомным действием. Это обстоятельство учитывалось нами при разработке технологического способа получения настойки эхинацеи пурпурной.
[6]
[7]За прототип изобретения нами взят способ получения настойки эхинацеи пурпурной из воздушно-сухой
травы с использованием 40% этилового спирта и метода модифицированной мацерации [9]. Сущность этого метода заключается в том, что растительное сырье заливают 40% этилового спирта, извлекают
настаиванием в течение 24 ч в каждом перколяторе и последующей 2-кратной экстракцией 40% спиртом с использованием термического воздействия. Недостатками этого метода являются неполная экстракция сырья
и, как следствие, невысокий выход целевых веществ, а также финансовые издержки, связанные с подготовкой сырья - сушкой травы эхинацеи пурпурной.
[8]Цель изобретения - повышение выхода
целевых веществ из травы эхинацеи пурпурной и их содержания в целевом продукте, а также снижение себестоимости получаемого средства.
[9]Сущность заявляемого способа заключается в том, что в
качестве сырья используют траву эхинацеи пурпурной свежую, а извлечение целевых веществ осуществляют 40...70% этиловым спиртом методом модифицированной мацерации, сочетающей экстракцию при комнатной
температуре и при нагревании в интервале температур 80-90°С. Данный метод позволяет, с одной стороны, в щадящем режиме получать наиболее обогащенные вытяжки, а с другой, - достигать
исчерпывающей экстракции (выход целевых веществ составляет 98,7% по сравнению с 93,0% в прототипе).
[10]Проведенный заявителем поиск по научно-техническим и патентным источникам информации
и выбранный из перечня аналогов прототип [9] позволили выявить отличительные признаки в заявляемом техническом решении. Следовательно, заявляемый способ получения удовлетворяет критерию изобретения
"новизна".
[11]Проведенный заявителем дополнительный поиск известных технических решений [1-3, 5, 6, 11-13, 15-17] с целью обнаружению в них признаков, сходных с признаками отличительной
части формулы заявляемого способа получения, показал, что эти признаки отсутствуют, следовательно, заявляемое техническое решение удовлетворяет критерию "изобретательский уровень".
[12]
Критерий изобретения "промышленная применимость" подтверждается тем, что предлагаемый способ получения настойки эхинацеи пурпурной позволяет получить в промышленном производстве лекарственный препарат,
достаточно простой в изготовлении и относительно дешевый из-за отсутствия в технологической схеме производства дорогостоящего оборудования, но обладающий выраженными иммуномодулирующими свойствами.
Кроме того, в Самарской области имеются и другие объективные предпосылки для производства доступных и эффективных экопротекторов на основе травы эхинацеи пурпурной, так как на Средне-Волжской
зональной опытной станции НПО "ВИЛАР" (пос.Антоновка) и в специализированном предприятии "Кентавр" (с.Березовка) созданы промышленные плантации этого растения.
[13]Разработанный способ
получения иллюстрируется примерами 1 и 2, а также чертежом технологической схемы получения настойки эхинацеи пурпурной.
[14]Пример 1. 1500,0 г травы эхинацеи пурпурной свежей распределяют
по 500,0 г в 3 экстрактора. В 1-й экстрактор заливают двукратное количество 70% этилового спирта (1000 мл) для экстракции сырья в течение 24 часов при комнатной температуре. Во 2-й экстрактор помещают
150 мл 70% этилового спирта для замачивания и оставляют на 24 ч.
[15]Через 24 ч (2-ой день) из 1-го экстрактора переливают 900 мл извлечения во 2-ой экстрактор и оставляют на 24 ч при
комнатной температуре. В данную мацерационную паузу в 1-й экстрактор помещают 500 мл 70% спирта и проводят термическую экстракцию (2t) с обратным холодильником при температуре 80-90°С в течение
30 мин. Полученное извлечение (2t-1) из 1-го экстрактора переливают в приемник 1 и используют на последующих стадиях для экстракции сырья во 2-ом экстракторе. В 3-ий экстрактор помещают 150 мл 70%
этилового спирта для замачивания и оставляют на 24 ч.
[16]Через 24 ч (3-й день) из 2-го экстрактора переливают 950 мл извлечения в 3-й экстрактор и оставляют на 24 ч для экстракции при
комнатной температуре. В данную мацерационную паузу в 1-й экстрактор помещают 500 мл 70% спирта и проводят термическую экстракцию (3t) с обратным холодильником при температуре 80-90°С в течение
30 мин. Полученное извлечение (3t-1) из 1-го экстрактора переливают в приемник 1 и используют на последующих стадиях для экстракции сырья во 2-м экстракторе. Извлечение (2t-1) из приемника 1 переносят
в экстрактор 2 и осуществляют термическую экстракцию с обратным холодильником при температуре 80-90°С в течение 30 мин. Полученное извлечение (2t-2) из 2-го экстрактора переливают в приемник 2
и используют на последующих стадиях для экстракции сырья во 3-м экстракторе. Полученное извлечение (3t-1) из 1-го экстрактора переливают в приемник 1 и используют на последующих стадиях для экстракции
сырья во 2-м экстракторе.
[17]Через 24 ч (4-й день) осуществляют слив извлечения из 3-го экстрактора в сосуд с готовой продукцией (1000 мл). Извлечение (2t-2) из 2-го приемника (500 мл)
переливают в 3-й экстрактор и осуществляют термическую экстракцию с обратным холодильником при температуре 80-90°С в течение 30 мин. 500 мл извлечения (2t-3) из 3-го экстрактора отфильтровывают
в сосуд с готовым продуктом. Затем извлечение (3t-1) из приемника 1 переносят во 2-й экстрактор и осуществляют термическую экстракцию (3t) с обратным холодильником при температуре 80-90°С в
течение 30 мин. Полученное извлечение (3t-2) из 2-го экстрактора отфильтровывают в приемник 3, переносят его в 3-й экстрактор и сразу проводят термическую экстракцию с обратным холодильником при
температуре 80-90°С в течение 30 мин. Полученное извлечение (3t-3) из 3-го экстрактора отфильтровывают в сборник с готовым продуктом и при этом получают в общей сложности 1500 мл готового
продукта.
[18]Полученный готовый продукт (1500 мл) выдерживают при температуре 8°С в течение 2-3 дней и фильтруют.
[19]Содержание суммы фенилпропаноидов (целевые вещества)
в готовом продукте, определенное с использованием описанной в литературе методики анализа [8], составляет в пересчете на цикориевую кислоту 0,78%. Выход целевых веществ составляет 98,7% от
теоретического (содержание суммы фенилпропаноидов в траве эхинацеи пурпурной составляет 3,95%). Сухой остаток, определенный в соответствии с ГФ СССР XI издания [4], составляет 12,9%.
[20]
Пример 2. 1500,0 г травы эхинацеи пурпурной свежей распределяют по 500,0 г в 3 экстрактора. В 1-й экстрактор заливают двукратное количество 40% этилового спирта (1000 мл) для экстракции сырья в
течение 24 часов при комнатной температуре. Во 2-й экстрактор помещают 150 мл 40% этилового спирта для замачивания и оставляют на 24 ч. Далее технологический процесс осуществляют в соответствии с
примером 1, используя в качестве экстрагента 40% этиловый спирт.
[21]Содержание суммы фенилпропаноидов (целевые вещества) в готовом продукте, определенное с использованием описанной в
литературе методики анализа [8], составляет в пересчете на цикориевую кислоту - 0,76%. Выход целевых веществ составляет 96,2% от теоретического (содержание суммы фенилпропаноидов в траве эхинацеи
пурпурной составляет 3,95%). Сухой остаток, определенный в соответствии с ГФ СССР XI издания [4], составляет 13,7%.
[22]Пример 3. 1500,0 г травы эхинацеи пурпурной свежей распределяют по
500,0 г в 3 экстрактора. В 1-й экстрактор заливают однократное количество 70% этилового спирта (500 мл) для экстракции сырья в течение 24 часов при комнатной температуре. Во 2-й экстрактор помещают
150 мл 70% этилового спирта для замачивания и оставляют на 24 ч. Далее технологический процесс осуществляют в соответствии с примером 1, используя в качестве экстрагента 70% этиловый спирт в
соотношении сырье:экстрагент 1:1.
[23]Содержание суммы фенилпропаноидов (целевые вещества) в готовом продукте, определенное с использованием описанной в литературе методики анализа [8],
составляет в пересчете на цикориевую кислоту 0,77%. Выход целевых веществ составляет 97,4% от теоретического (содержание суммы фенилпропаноидов в траве эхинацеи пурпурной составляет 3,95%). Сухой
остаток, определенный в соответствии с ГФ СССР XI издания [4], составляет 12,7%.
[24]Пример 4. 1500,0 г травы эхинацеи пурпурной свежей распределяют по 500,0 г в 3 экстрактора. В 1-й
экстрактор заливают однократное количество 40% этилового спирта (500 мл) для экстракции сырья в течение 24 часов при комнатной температуре. Во 2-й экстрактор помещают 150 мл 40% этилового спирта для
замачивания и оставляют на 24 ч. Далее технологический процесс осуществляют в соответствии с примером 1, используя в качестве экстрагента 40% этиловый спирт в соотношении сырье:экстрагент 1:1.
[25]Содержание суммы фенилпропаноидов (целевые вещества) в готовом продукте, определенное с использованием описанной в литературе методики анализа [8], составляет в пересчете на цикориевую
кислоту 0,75%. Выход целевых веществ составляет 95,0% от теоретического (содержание суммы фенилпропаноидов в траве эхинацеи пурпурной составляет 3,95%). Сухой остаток, определенный в соответствии с
ГФСССР XI издания [4], составляет 13,3%.
[26]Исследование запредельных параметров технологического процесса дает следующие результаты. Использование концентрации спирта ниже 40%, в
частности 30% этилового спирта (пример 5), на стадии экстракции приводит к резкому снижению выхода целевых веществ (76,0% от теоретического содержания суммы фенилпропаноидов в сырье) и, следовательно,
к снижению содержания фенилпропаноидов в настойке эхинацеи пурпурной (0,60%), хотя показатель "сухой остаток" за счет извлечения полисахаридов достаточной высокий (13,9%).
[27]Использование
80% и 96% этилового спирта (примеры 6 и 7) на стадии экстракции также приводит к снижению выхода целевых веществ (соответственно 85,0% и 73,0% от теоретического содержания суммы фенилпропаноидов в
сырье) и, следовательно, к снижению содержания фенилпропаноидов в настойке эхинацеи пурпурной (0,65% и 0,53% соответственно). Кроме того, в случае примеров 6 и 7 резко снижается показатель "сухой
остаток" (8,5% и 6,7% соответственно), что свидетельствует о неполной экстракции второй группы БАС - полисахаридов.
[28]Следовательно, оптимальными параметрами способа получения являются:
экстракция травы эхинацеи пурпурной свежей 40...70% этиловым спиртом в соотношении сырье:экстрагент в интервале 1:1-1:2. Данные параметры позволяют получать целевой продукт из травы эхинацеи пурпурной
свежей (примеры 1-4) с высоким выходом целевых веществ, с высоким содержанием действующих веществ в препарате (табл.1 и 2).
[29]Сравнительная характеристка заявляемого способа и способа
прототипа (табл.1 и 2) свидетельствуют о том, что заявляемый способ обеспечивает более высокий выход фенилпропаноидов (в 1,06 раза) из травы эхинацеи пурпурной свежей, а получаемый препарат дешевле
лекарственного средства, получаемого по способу прототипа, в 1,7 раза, а зарубежных аналогов - в 13-17 раз (табл.1 и 2).
[30]Таблица 1
Выход целевых веществ и качество целевого продукта в зависимости от способа получения настойки эхинацеи
пурпурной и других препаратов |
| №№ | Способ получения | Содержание
фенилпропаноидов, % | Выход целевых веществ, % | Сухой остаток, % | Стоимость,
руб. |
| 1. | Заявляемый способ: | | | | |
| | Пример 1. 70% спирт (1:2) | 0,78 | 98,7 | 12,
9 | 9=00 |
| | Пример 2. 40% спирт (1:2) | 0,76 | 96,2 | 13,7 | 8=00 |
| | Пример 3. 70% спирт (1:1) | 0,77 | 97,
4 | 12,7 | 8=00 |
| |
Пример 4. 40% спирт (1:1) | 0,75 | 95,0 | 13,3 | 7-00 |
| 2. | Прототип | 0,71 | 93,0 | 11,6 | 15=00 |
| 3. | Эхинацея-Галенофарм (Россия) | 0,70 | 92,0 | 9,0 | 30=00 |
| 4. | Иммунал (Словения) (способ прессования: сок + 20% спирта) | 0,106 | | 5,2 | 120=00 |
| 5. | Эхинацин Ликвидум (Германия) (способ прессования: сок + 22% спирта) | 0,
064 | | 4,8 | 150=00 |
[31]Таблица 2
Сравнительная характеристика заявляемого способа и способа
прототипа |
| №№ п/п | Параметры способа | Заявляемый способ | Прототип | Преимущества заявляемого способа |
| 1. | Экстрагент | Этиловый спирт (40%...70%) | Этиловый спирт (40%) | Шире диапазон концентрации спирта |
| 2. | Выход действующих веществ, в % | 98,7 | 93,0 | Более высокий выход фенилпропаноидов (в 1,06 раза) |
| 3. | Сырье | Трава эхинацеи пурпурной свежая | Трава
эхинацеи пурпурной (воздушно-сухая) | На 30% уменьшены финансовые издержки, связанные с сушкой сырья |
|
4. | Себестоимость препарата (упаковка - 30 мл) | 8-9 руб. | 15 руб. | Дешевле в 1,7 раза |
[32]Примечательно, что настойка эхинацеи пурпурной значительно (в 7-10 раз) превосходит по
содержанию целевых веществ такие зарубежные препараты на основе сока свежей травы эхинацеи пурпурной, как "Эхинацин" (содержание фенилпропаноидов 0,064%) и "Иммунал" (содержание фенилпропаноидов 0,
106%) (табл.1). Более чем в 2 раза целевой продукт, полученный заявляемым способом, превосходит зарубежные аналоги и по показателю "сухой остаток" (табл.1).
[33]Использование заявляемого
способа позволяет осуществлять производство в условиях фармацевтической фабрики и других фармацевтических предприятий, где отсутствует дорогостоящее оборудование, необходимое для получения очищенных
субстанций и таблетированных лекформ на их основе. Положительный эффект заявляемого способа заключается в том, что выход целевых веществ из сырья увеличивается до 98,7% по сравнению с 93,0% в
прототипе, а содержание целевых веществ (сумма фенилпропаноидов в пересчете на цикориевую кислоту) в готовом продукте составляет 0,78%, т.е. увеличивается в 1,10 раза по сравнению с аналогичным
показателем в целевом продукте (0,71%), полученным способом, описанным в прототипе [9]. С этими данными коррелируют и результаты определения сухого остатка в целевом продукте, полученным заявляемым
способом и способом прототипа - соответственно 12,9% и 11,6%.
[34]Исходя из этого, можно сделать вывод о том, что внедрение заявляемого способа позволит получать простое в изготовлении и
относительно дешевое конкурентоспособное иммуномодулирующее средство.
[35]О целесообразности такого подхода к получению целевых веществ и, следовательно, о положительном эффекте
свидетельствует также то обстоятельство, что полученная настойка обладает выраженными иммуномодулирующими свойствами (табл.3 и 4). Иммунологические исследования образцов настойки эхинацеи пурпурной,
полученных заявляемым способом (примеры 1 и 2), выполнены в соответствии с рекомендациями ВОЗ и отечественных авторов (Петров Р.В., Хаитов P.M., Орадовская И.В. // Иммунология. - 1992, №4. - С.43-53)
на базе отдела иммунологии НИЦ СамГМУ и Самарского областного профпатологического центра. Содержание Ig классов А, М, G и орозомукоида в сыворотке определяли методом Манчини (радиальная иммунодиффузия
в геле с моноклональными антителами). Для оценки состояния нейтрофилов периферической крови использовали латекс производства Института биологического приборостроения (Москва); устанавливая процент
клеток, фагоцитирующих частицы. Концентрацию фибронектина плазмы в нанограммах/миллилитр исследовали с помощью твердофазного иммуноферментного анализа на многоканальном спектрофотометре "Dynatech MR
5000" (США) при длине оптической волны 492 нанометра. Содержание лизоцима в сыворотке определяли турбидиметрическим методом с использованием ацетонированного микрококка и выражали в единицах
активности. Одновременно проводили общий клинический анализ крови с подсчетом элементов лейкоцитарной формулы для определения абсолютного количества клеток иммунной системы. Иммунофлуоресценция
оценивалась на проточном цитометре "Epics-Profile" фирмы "Coulter" и с помощью люминесцентной приставки к оптическому микроскопу ЛН-130 МС, изготовленной научно-производственной лабораторией
"Медимакс" (Москва).
[36]Таким образом, проведенные иммунологические исследования свидетельствуют о том, что настойка эхинацеи пурпурной, полученная заявляемым способом, обладает
выраженными иммуномодулирующими свойствами, причем положительная динамика показателей гуморального иммунитета у пациентов с хроническим пылевым бронхитом (две группы больных) отмечена нами как после
курса лечения, так и после перерыва в течение 1 года (табл.3 и 4).
[37]Заслуживает внимания и то обстоятельство, что положительная динамика параметров иммунного гомеостаза происходит при
дозировке 5 капель препарата на прием 2 раза в день, тогда как в случае эхинацина и иммунала в инструкции по применению данных средств рекомендуется использование до 40-50 (!) капель, причем каждый
час на фоне обострения заболевания.
[38]Таблица 3
Показатели гуморального иммунитета у пациентов с хроническим пылевым бронхитом (воспалительная форма), получавших иммунокорригирующую терапию настойкой эхинацеи пурпурной на 70% спирте (пример
1) |
| Показатель | До лечения (n=21) |
Настойка эхинацеи пурпурной на 70% спирте(n=21) | Контрольная группа - здоровые доноры (n=64) | Через 1 год после
лечения (n=21) |
| Фагоцитоз, % | 57,0±7,0 | 70,0±9,0 | 78,0±6,0 | 66,0±5,0 |
| IgA, г/л | 1,67±0,18 | 2,23±0,15 | 1,
83±0,37 | 2,01±0,09 |
| IgM, г/л |
1,21+0,11 | 1,3±0,10 | 1,39±0,02 | 1,4±0,11 |
| IgG, г/л | 11,53±1,35 | 18,45±1,22 | 14,78±0,23 | 15,33±1,19 |
| Комплемент,
е.а. | 38,9±2,4 | 52,5±2,2 | 55,3±2,6 | 50,0±1,8 |
| Лизоцим, е.а. | 20,5±1,8 | 40,5±2,3 | 34,5±1,8 | 38,3±2,0 |
| Орозомукоид, г/л | 0,631±0,119 | 0,822±0,027 | 0,781±0,030 | 0,715±0,019 |
|
Фибронектин, нг/мл | 177±25 | 351±19 | 286±20 | 367±22 |
Таблица 4
Показатели гуморального иммунитета у пациентов с хроническим
пылевым бронхитом (воспалительная форма), получавших иммунокорригирующую терапию настойкой эхинацеи пурпурной на 40% спирте (пример 2) |
|
Показатель | До лечения (n=21) | Настойка эхинацеи пурпурной на 40% спирте (n=21) | Контрольная группа - здоровые доноры (n=64) | Через 1 год после лечения (n=21) |
|
Фагоцитоз, % | 52,0±5,0 | 69,0±4,0 | 78,
0±6,0 | 70,0±6,0 |
| IgA, г/л | 1,
55±0,20 | 1,99+0,22 | 1,83±0,37 | 2,09±0,19 |
| IgM, г/л | 1,12±0,13 | 1,45±0,11 | 1,39±0,02 | 1,53±0,13 |
| IgG, г/л | 13,51±1,42 | 15,77±0,58 | 14,78±0,23 | 16,45±0,52 |
| Комплемент, е.а. | 42,7±3,
0 | 52,1±2,2 | 55,3±2,6 | 53,0±1,8 |
| Лизоцим, е.а. | 18,1±1,4 | 26,1±1,9 | 34,5±1,8 | 27,2±1,7 |
| Орозомукоид, г/л | 0,544±0,122 | 0,688±0,111 | 0,781±0,030 | 0,721±0,092 |
| Фибронектин, нг/мл | 190±
34 | 312±24 | 286±20 | 306±20 |
[39]Таким образом, использование заявляемого способа дает следующие преимущества:
[40]1. Использование в заявляемом способе травы эхинацеи пурпурной свежей,
40...70% этилового спирта в соотношении "сырье:экстрагент" в интервале значений 1:1÷1:2 позволяет повысить выход целевого продукта (фенилпропаноиды) из сырья данного растения до 98,7% по
сравнению с 93,0% в случае прототипа.
[41]2. Содержание целевых веществ в готовом продукте, полученным заявляемым способом, составляет 0,78% по сравнению с 0,71% в прототипе (увеличение в 1,
10 раза).
[42]3. Показатель "сухой остаток", позволяющий косвенно оценивать содержание полисахаридов - второй группы БАС, увеличивается в 1,11 раза (с 11,6% в прототипе до 12,9-13,7% в
заявляемом способе).
[43]4. Стоимость целевого продукта уменьшается в 1,7 раза по сравнению с прототипом и в 13-17 раз дешевле зарубежных аналогов, в частности, препаратов "Иммунал" и
"Эхинацин Ликвидум", хотя по содержанию целевых веществ данные средства уступают настойке эхинацеи пурпурной соответственно в 7 и 10 раз и по показателю "сухой остаток" более чем в 2 раза.
[44]5. Использование травы эхинацеи пурпурной свежей в заявляемом способе позволяет уменьшить себестоимость средства на 30% за счет исключения финансовых расходов, связанных с сушкой сырья.
[46]1. Васильев В.Н., Черкас В.Я., Савченко А.Г., Горбатенко В.В., Дегтярь Н.И. Использование препаратов эхинацеи и элеутерококка для повышения
иммунобиологической сопротивляемости и снижения признаков усталости // Изучение и использование эхинацеи: Материалы Международной научной конференции / Под ред. Самородова В.Н. и др. - Полтава:
Верстка, 1998. - С.107-108.
[47]2. Войтенко Г.Н., Лисица О.И., Яковлева Н.Ю., Усова Е.И. Применение настойки эхинацеи пурпурной в педиатрической практике // Изучение и использование
эхинацеи: Материалы Международной научной конференции / Под ред. Самородова В.Н. и др. - Полтава: Верстка, 1998. - С.108-109.
[48]3. Временная фармакопейная статья 42-2371-94. "Трава
эхинацеи пурпурной". - М., 1994. - 8 с.
[49]4. Государственная фармакопея СССР: Вып.2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. - 11-е изд. - М.: Медицина, 1989.
- 400 с.
[50]5. Государственный реестр лекарственных средств. - Т.1. Официальное издание. - М.: ОАО "Издательство "Медицина", 2004. - 1404 с.
[51]6. Зузук Б.М., Рыбак О.В., Дячок
В.В. Биологически активные вещества эхинацеи пурпурной и проблема стандартизации ее сырья и препаратов // Изучение и использование эхинацеи: Материалы Международной научной конференции / Под ред.
Самородова В.Н. и др. - Полтава: Верстка, 1998. - С.75.
[52]7. Куркин В.А. Фенилпропаноиды - перспективные природные биологически активные соединения. - Самара, 1996. - 80 с.
[53]
8. Куркин В.А. Количественное определение суммы гидроксикоричных кислот в надземной части Echinacea purpurea (L.) Moench. / В.А. Куркин, О.И. Авдеева, П.Г. Мизина // Растительные ресурсы. - 1998.
- Т.34. - Вып.2. - С.81-85.
[54]9. Куркин В.А., Косарев В.В., Авдеева О.И., Авдеева Е.В., Мизина П.Г., Жестков А.В. Способ получения иммуномодулирующего препарата "Настойка эхинацеи
пурпурной". - Патент РФ № 2134584. Бюл. № 23 от 20.08.99 г.
[55]10. Куркин В. А. Фармакогнозия: учебник для студентов фармацевтических вузов. - Самара: OOO "Офорт", ГОУВПО "СамГМУ", 2004.
1180 с.
[56]11. Муравьев И.А. Технология лекарств. Изд. 3-е, перераб. и доп. - Т.1. - М.: Медицина, 1980. - С.704 с.
[57]12. Настойка Echinacea purpurea L., средство на основе
Echinacea purpurea L. и способ их получения // ОАО "Фармацевтическая фабрика Санкт-Петербурга". - Патент РФ № 2163138. А 61 К 35/78. Опубл. 20.02.2001 г.
[58]13. Регистр лекарственных
средств России. Энциклопедия лекарств. - М.: OOO "РЛС-2003, 2003. - 1438 с.
[59]14. Самородов В.Н. Фитохимический состав представителей рода эхинацея (Echinacea Moench.) и его
фармакологические свойства (обзор) / В.Н.Самородов, С.В.Поспелов, Г.Ф.Моисеев и др. // Химико-фармац. журнал. - 1996. - Т.30, № 4. - С.32-37.
[60]15. Самородов В.Н. Изучение и использование
эхинацеи / В.Н. Самородов и др. // Материалы Международной научной конференции - Полтава: Верстка, 1998. - 156 с.
[61]16. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник.
- М.: АстраФармСервис, 2005. - 1536 с.
[62]17. Стихин В.А., Сенина Т.А., Алентьева О.Г., Климахин Г.И. Трава эхинацеи пурпурной - новое лекарственное растительное сырье // Первый
международный симпозиум "Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования": Тезисы докладов. - Пущино, 1995. - С.786-788.
[63]18. Bauer R., Wagner H. Echinacea:
Handbuch fur Arzte Apotheker und andere Naturwissenschaftler. - Stuttgart: Wissenschaftliche Verlagsgeselschaft, 1990. - 182 s.
[64]19. Cheminat A., Zawatzky R., Becker H. et al. Caffeoyl
conjugates from Echinacea species: structures and biological activity // Phytochemistry. - 1988. - Vol.27, N.9. - P.2728-2794.
[65]20. He X.-G., Lin L.-Z., Bemart M.W., Lian L.-Z. Analysis
of alkamides in roots and achens of Echinacea purpurea by liquid chromatography-electrospray mass spectrometry // J. of Chromatography. - 1998. - Vol.815 A. - P.205-211.
[66]21. Proksch A.,
Wagner H. Structural analysis of a 4-0-methylglucuronoarabinoxylan with immuno-stimulanting activity from Echinacea purpurea // Phytochemistry. - 1987. - Vol.26, N.7. - P.1989-1993.
[67]22.
Wagner H. Pharmazeutische Biologie. Drogen und ihre Inhaltsstoffe. - Stuttgart-New York: Gustav Fischer Verlag, 1993. - 522 s.
