[1]1. Гуманизированное антитело, которое связывается с TGF-бета, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи (VH), который содержит остатки
гипервариабельной области, не относящиеся к человеческим, включенные в человеческий домен VH, где указанный вариабельный домен включает замену каркасного участка (FR) в последовательности
SEQ ID NO: 6 в положении, выбранном из группы, состоящей из 48, 49, 67, 69, 71, 73 и 78, с использованием системы нумерации, представленной Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological
Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991).
[2]2. Гуманизированное антитело по п.1, содержащее замены FR в положениях 49, 67 и
71.
[3]3. Гуманизированное антитело по п.2, в котором в положении 49 аланин заменен на глицин, в положении 67 фенилаланин заменен на аланин и в положении 71 аргинин заменен на аланин.
[4]4. Гуманизированное антитело по п.1, содержащее замены FR в положениях 48, 49 и 71.
[5]5. Гуманизированное антитело по п.4, в котором в положении 48 валин заменен на изолейцин, в
положении 49 аланин заменен на глицин и в положении 71 аргинин заменен на аланин.
[6]6. Гуманизированное антитело по п.1, содержащее замены FR в положениях 49, 69 и 71.
[7]7.
Гуманизированное антитело по п.6, в котором в положении 49 аланин заменен на глицин, в положении 69 изолейцин заменен на лейцин и в положении 71 аргинин заменен на аланин.
[8]8.
Гуманизированное антитело по п.6, в котором дополнительная замена FR находится в положении 73.
[9]9. Гуманизированное антитело по п.8, в котором в положении 73 аспарагин заменен на
лизин.
[10]10. Гуманизированное антитело по п.1, содержащее замены FR в положениях 49, 71 и 73.
[11]11. Гуманизированное антитело по п.10, в котором в положении 49 аланин заменен
на глицин, в положении 71 аргинин заменен на аланин и в положении 73 аспарагин заменен на лизин.
[12]12. Гуманизированное антитело по п.1, содержащее замены FR в положениях 49, 71 и 78.
[13]13. Гуманизированное антитело по п.12, в котором в положении 49 аланин заменен на глицин, в положении 71 аргинин заменен на аланин и в положении 78 лейцин заменен на аланин.
[14]
14. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, содержащее остатки определяющего комплементарность участка (CDR) вариабельного домена легкой цепи (VL) RASQSVLYSSNQKNYLA (SEQ ID NO: 36)
или RASQGISSYLA (SEQ ID NO: 37); WASTRES (SEQ ID NO: 38) или YASSLQS (SEQ ID NO: 39) и HQYLSSDT (SEQ ID NO: 40).
[15]15. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, содержащее остатки
определяющего комплементарность участка (CDR) вариабельного домена легкой цепи (VL) RASQSVLYSSNQKNYLA (SEQ ID NO: 36); WASTRES (SEQ ID NO: 38) и HQYLSSDT (SEQ ID NO: 40).
[16]16.
Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, содержащее аминокислотную последовательность домена VLв SEQ ID NO: 3.
[17]17. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13,
содержащее остатки определяющего комплементарность участка (CDR) домена VН GYAFTNYLIE (SEQ ID NO: 41); VNNPGSGGSNYNEKFKG (SEQ ID NO: 42) или VINPGSGGSNYNEKFKG (SEQ ID NO: 43) и SGGFYFDY
(SEQ ID NO: 44).
[18]18. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, содержащее остатки определяющего комплементарность участка (CDR) домена VН GYAFTNYLIE (SEQ ID NO: 41);
VNNPGSGGSNYNEKFKG (SEQ ID NO: 42) и SGGFYFDY (SEQ ID NO: 44).
[19]19. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, содержащее остатки определяющего комплементарность участка (CDR) домена
VН GYAFTNYLIE (SEQ ID NO: 41); VINPGSGGSNYNEKFKG (SEQ ID NO: 43) и SGGFYFDY (SEQ ID NO: 44).
[20]20. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-3, содержащее аминокислотную
последовательность домена VНв SEQ ID NO: 4.
[21]21. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, которое представляет собой интактное IgG1 антитело.
[22]22.
Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, которое представляет собой фрагмент антитела.
[23]23. Гуманизированное антитело по п.22, которое представляет собой фрагмент Fab.
[24]24. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, которое не конъюгировано с цитотоксическим средством.
[25]25. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-13, которое
конъюгировано с цитотоксическим средством.
[26]26. Композиция, содержащая гуманизированное антитело по любому из пп.1-25 и носитель.
[27]27. Выделенная нуклеиновая кислота,
кодирующая гуманизированное антитело по любому из пп.1-25.
[28]28. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.27.
[29]29. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по
п.27.
[30]30. Способ получения гуманизированного антитела, предусматривающий культивирование клетки-хозяина по п.29 таким образом, что экспрессируется нуклеиновая кислота и продуцируется
антитело.
[31]31. Способ по п.30, дополнительно предусматривающий выделение антитела из культуры клетки-хозяина.
[32]32. Способ по п.31, в котором антитело выделяют из
культуральной среды клетки-хозяина.
[33]33. Способ по любому из пп.30-32, в котором перед культивированием клетку-хозяина котрансфицируют с вектором, содержащим нуклеиновую кислоту,
кодирующую вариабельный домен тяжелой цепи и с вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую вариабельный домен легкой цепи.
[34]34. Способ лечения нарушения, опосредованного
TGF-бета, у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему эффективного количества гуманизированного антитела по любому из пп.1-25.
[35]35. Способ по п.34, в котором
млекопитающее является приматом.
[36]36. Способ по п.34 или 35, в котором млекопитающее является человеком.
[37]37. Способ по любому из пп.34-35, в котором нарушение представляет
фиброз, повреждение артерий, инфекцию, ревматоидный артрит или злокачественную опухоль.
[38]38. Способ по п.37, в котором злокачественная опухоль представляет злокачественную опухоль
ободочной кишки, злокачественную опухоль ободочной и прямой кишки, злокачественную опухоль прямой кишки, злокачественную опухоль легких, злокачественную опухоль молочной железы, злокачественную
опухоль яичников или злокачественную меланому.
[39]39. Способ по любому из пп.34-35, дополнительно предусматривающий введение млекопитающему эффективного количества терапевтического
средства иного чем гуманизированное антитело.
[40]40. Способ по п.39, в котором терапевтическое средство представляет химиотерапевтическое средство, цитотоксический препарат, цитокин,
средство, ингибирующее рост, антиангиогенный препарат или антитело.
[41]41. Способ по п.40, в котором терапевтическое средство представляет антиангиогенный препарат.
[42]42.
Способ по п.39, в котором терапевтическое средство представляет антитело.
[43]43. Способ по п.42, в котором антитело связывается с васкулярным эндотелиальным фактором роста.
[44]
44. Способ по п.42, в котором антитело связывается с антигеном Her-2.
[45]45. Способ по любому из пп.42-44, в котором антитело представляет собой интактное антитело.
[46]46.
Способ по любому из пп.42-44, в котором антитело представляет собой фрагмент антитела.
[47]47. Способ по п.46, в котором фрагмент антитела представляет собой фрагмент Fab.
[48]
48. Способ по любому из пп.42-44, в котором антитело конъюгировано с цитотоксическим средством.
[49]49. Способ по любому из пп.42-44, в котором антитело не конъюгировано с цитотоксическим
средством.
[50]50. Способ детектирования TGF-бета в пробе из организма, который предусматривает контактирование гуманизированного антитела по любому из пп.1-25 с пробой из организма и
определение того, происходит ли связывание антитела с TGF-бета.
[51]51. Изделие, содержащее контейнер, включающий гуманизированное антитело по любому из пп.1-25 и инструкции для потребителя
с указанием для лечения опосредованного TGF-бета нарушения у млекопитающего антителом в эффективном количестве.
[52]52. Изделие по п.51, дополнительно содержащее контейнер, включающий
терапевтическое средство иное, чем гуманизированное антитело, где инструкции указывают потребителю, как лечить нарушение антителом в комбинации со средством в эффективных количествах.
[53]
53. Изделие по пп.51 или 52, где млекопитающее является человеком.
[54]54. Способ лечения злокачественной опухоли у млекопитающего, предусматривающий введение млекопитающему эффективного
количества антитела против TGF-бета и антитела, которое связывается с васкулярным эндотелиальным фактором роста.
[55]55. Способ по п.54, в котором млекопитающее является человеком.
[56]56. Способ по пп.54 или 55, в котором антитело против TGF-бета связывается с любым одним или несколькими из следующих: TGF-бета1, TGF-бета2 и TGF-бета3.
[57]57. Способ по любому из
пп.54-55, в котором антитело связывается с TGF-бета1.
[58]58. Способ по любому из пп.54-55, в котором антитело связывается с TGF-бета1 и TGF-бета2.
