Использование: в физико-химическом анализе, в частности в способе определения токсичности водной среды или контроля воды
. Сущность изобретения: способ предусматривает
обработку пробы лейкоформой красителя трифенилметанового ряда, пе- роксидазой и пероксидом водорода при их соотношении, равном (3-10):(0,2-2):(100- 1000), с доведением рН среды до 2,2-4,8 и
физико-химическим определением токсиканта Вода считается токсичной при величине адсорбции выше 0,3 мин экв/л. 4 табл.
Таблица Сравнение исследования токсичности пробы, содержащей восстановительный эквивалент (гидрохинон) при различном соотношении компонентов тестирующий смеси 1 - 1. Краситель : пероксидаза : пероксид водорода - 3 : 0.2 : 100
2. Краситель : пероксидэза : пероксид водорода 10 : 2,0 : 1000 Результаты химического и биологического определения
токсичности смеси, содержащей модельной токсикант- восстановитель гидрохинон Результаты химического и биологического определения токсичности смеси, содержащей модельное вещество восстановительного характера М-аминофенол Продолжение табл.1. Таблица 2 Таблица 3 Таблица 4
Изобретение относится к методам исследования водных сред с использованием
составов для физико-химического анализа и может быть использовано в гидробиологии,
гидрохимии и при контроле качества воды. Известен способ определения степени
токсичности природных и сточных вод, основанный на ответной реакции гидробион-
тов различных систематических групп, дающих возможность получения комплексной
оценки токсичности водных сред. Недостатком известного метода является низкая
чувствительность и скорость, а также сложность анализа. Целью изобретения является повышение чувствительности, упрощение и ускорение анализа. Для достижения указанной цели в способе определения токсичности водной среды
путем добавления в нее лейкоформы красителя трифенилмеганового ряда и пе-
роксидазы, доведения величины рН до 2,2- 4,8 и физико-химического определения
концентрации токсиканта, в воду дополнительно вводят пероксид водорода при соотношении лейкоосноваиия красителя трифенилметанового ряда: пероксидазы: перок-
сида водорода (3-10):(0,2-2,0).(100-1000). а токсичной считают воду с приведенной
величиной адсорбции меньше 0,7. Введение пероксида водорода в смесь,
состоящую из лейкооснования красителя трифенилметанового ряда и пероксидазы, в
предложенном соотношении компонентов позволяет получить перекисно-пероксидаз-
ный комплекс, взаимодействующий конкурентным образом с лейкоформой красителя
трифенилметанового ряда и токсикантами- восстановителями. При этом пояиляется
возможность фиксирования наличия токсичных веществ восстановительной природы
в той концентрации, в которой они находятся в природной воде, поскольку константы
взаимодействия красителя с пере- кисно-пероксидазным комплексом меньше
или равна константе взаимодействия токсикантов-восстановителей с перекисио-пе-
роксидазным комплексом. Данное свойство предложенной смеси позволяет исключить
влияние нетоксичных веществ, имеющих 73 с го о о о ел о ю о низкую константу взаимодействия, и определить наличие только токсикантов-восстановителей
в концентрации, в которой они находятся в природной воде. Граничные значения диапазонов, входящих в смесь веществ, определены исходя
из следующего. При количестве компонент смеси ниже или выше граничных значений
резко снижается чувствительность способа. В табл. 1 приведены данные, .доказывающие
работоспособность предложенного диапазона компонент, входящих в предложенную смесь. Величина адсорбции для концентрации восстановителя, принятой за параметр токсичности
и равной 3 мкг экв/л , соответствует величине, приведенной (к единице
длины оптического пути, 1 см) адсорбции анализируемой смеси, равной 0,7. Примеры конкретного выполнения. Реагенты готовят растворением 1 мл
концентрированного пероксида водорода (10 м/л) в дистиллированной воде (1:10000),
навески Фосфорнокислого калия одноэаме- щенного массой 68 г в 1000 мл дистиллиро-
ванной воды (рН 4,5), навески массой 50 мг лейкоосновэния красителя орто-фторпроиз-
водного малахитового зеленого и 1 мл концентрированной соляной кислоты в 100 мл
дистиллированной воды, навески массой 20 мг перокгидэзы (удельной активностью
2150-500 ед/мг) в 10 мл дистиллированной ЦОД: I f анализируемой пробе воды приливают растворы красителя, пероксидазы, пероксида
зодорода в соотношении объемов, соответственно равных 8:0,5:400, доводят
рН среды до 2,2-4,8 с помощью фосфатного буферного раствора. Интенсивность окраски
устанавливается в течение 1 мин и cq- хранпется длительное время. Измеряют
адсорбцию анализируемой смеси при дли 0 5 0 5 0 5 0 нах волн 633. и 714 нм, соответствующих максимальному и минимальному поглощению соответственно. Установлена линейная зависимость между величиной адсорбции и содержанием
токсикантов-восстановителей. В табл. 2 и 3 приведены данные по исследованию
предлагаемым способом содержания токсикантов-восстановителей с
оценкой токсичности в соответствии с принятой шкалой токсичности, для исследования
приняты растворы, содержащие гидрохинон и М-аминофеиол, Способ позволяет избирательно оценить токсичность водных природных сред,
обусловленную наличием токсикантов-восстановителей в концентрациях, превышающих
физиологически опасный уровень. При этом определение токсичности проводится
оперативно, с достаточной степенью точности . В табл. 4 приведены данные, отражающие
время проведения работ по предложенному способу. Формула изобретен ия Способ определения токсичности водной среды, включающий приведение ее в
контакт с тестирующим обьектом и оценку параметра токсичности, отличающий-
с я тем, что, с целью повышения чувствительности , упрощения и ускорения анализа,
в качестве тестирующего объекта используют лейкооснование орто-фторпроизводного
малахитового зеленого и пероксидазу. после приведения в контакт с тестирующим
объектом добавляют пероксид водорода при соотношении лейкооснования, пероксидазы
и пероксида водорода (3-10):(0,2- 2,0):(100-1000), доводят рН среды до
2,2-4,8, в качестве параметра токсичности используют величину адсорбции анализируемой
смеси, а токсичной считают воду с величиной адсорбции меньше 3 мкг -экв/ .