[1]Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности, к лекарственным средствам на растительной основе с выраженным заживляющим, противовоспалительным действием на основе биологического сырья.
[3]При лечении ран основными требованиями к лекарственному препарату являются следующие его характеристики:
[4]- антибактериальные свойства препарата;
[5]- обеспечение ускорения процессов регенерации поврежденных тканей с последующей эпителизации раны;
[6]- эффективность против воспалительных процессов, вызванных продуктами распада тканей и продуктами жизнедеятельности клеток.
[7]В настоящее время для лечения ран используют препараты в различных лекарственных формах:
[8]- препаратов для перорального применения;
[9]- тампонов, салфеток, повязок, пропитанных растворами лекарственных веществ;
[10]- в виде мазей и порошков, содержащих, в том числе и антибиотики [1-3].
[11]Препараты для внутреннего применения как правило применяются в качестве одного из элементов при комплексной терапии, кроме того, они обладают достаточно широким спектром противопоказаний и побочных эффектов.
[12]К недостаткам наружных ранозаживляющих препаратов относят большой расход медикаментов, ограниченность применения для патологий, требующих длительного лечения и осложненных гнойными выделениями.
[13]Широко используются для лечения повреждений кожи различные кремы и мази, содержащие активные начала в виде витаминов, экстракты трав и т.п., жировую основу - воск, вазелин, глицерин, полиэтиленоксид и т.д., а также вспомогательные вещества, улучшающие эксплуатационные характеристики крема - отдушки, консерванты и т.д. [4-6].
[14]Наибольшую ранозаживляющую эффективность проявляют препараты, имеющие консистенцию геля или эмульсии, поскольку они легко наносятся на ожоговую поверхность и легко впитываются. Характер консистенции обеспечивается технологией получения лекарственного средства.
[15]Задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента противовоспалительных и ранозаживляющих лечебных средств на основе сырья, получаемого из зооглеи чайного гриба.
[16]При изучении доступных источников (научная литература, патенты) обнаружены сведения о множестве раневых покрытий, находящихся на различных этапах разработки, но при этом в качестве основного компонента культуральная жидкость чайного гриба не применялась. В заявляемом средстве отсутствуют токсические компоненты, но присутствуют культуральная жидкость чайного гриба (Medusomyces Gisevii Lindau), эфирное масло чайного дерева (Melaleuca alternifolia), масло миндальных орехов и ряд других компонентов.
[17]На настоящий момент для заживления ран наиболее часто используют следующие мази и гели: левомеколь, солкосерил, актовегин.
[18]Левомеколь - мазь белого цвета, для наружного применения, содержит в своем составе левомицетин. Препарат обладает выраженным антибактериальным эффектом, стимулирует восстановление нормальной структуры тканей ран различных форм. К недостаткам препарата можно отнести то, что его не рекомендуется применять длительное время из-за его аллергенности и токсического действия.
[19]Солкосерил - мазь для наружного применения, обладает ранозаживляющим, регенерирующим, антигипоксическим, мембраностабилизирующим, ангиопротективным, цитопротективным действием. При этом применение Солкосерила может приводить к появлению аллергических реакций по типу крапивницы или дерматита.
[20]Актовегин - гель для наружного применения, улучшает трофику и регенерацию тканей. Актовегин обладает значительным рядом побочных действий. В частности, в начале лечения препаратом могут быть местные болевые ощущения, связанные с отеком тканей.
[21]Раскрытие изобретения
[22]Задачей настоящего изобретения является расширение спектра противоожоговых средств и создание на основе растительного сырья лекарственного средства, обладающего высоким терапевтическим эффектом воздействия.
[23]Технический результат, который может быть получен с помощью предлагаемого изобретения, сводится к повышению ранозаживляющих, противовоспалительных, регенерирующих свойств при отсутствии аллергического действия.
[24]Технический результат достигается с помощью ранозаживляющей мази, содержащей культуральную жидкость чайного гриба, желатин кристаллический пищевой, бензокаин, масло миндальных орехов, глицерин, эфирное масло чайного дерева, лецинол, мас. % (Табл. 1):
[25]
[26]Осуществление изобретения
[27]Предлагаемый препарат готовят следующим образом.
[28]Для приготовления культуральной жидкости чайного гриба 10 г сухого черного чайного листа настаивалось в 1 л воды, доведенной до кипения. В дальнейшем полученный настой был отфильтрован, смешан со 100 г сахарозы, охлажден до комнатной температуры, после чего помещен в стеклянную посуду с добавлением среза зооглеи чайного гриба из расчета 10 г/л. Посуда с материалом для ферментации содержалась в воздушном термостате при температуре 27°C в течение 28 дней. По окончании ферментации полученная культуральная жидкость была отфильтрована через марлевый тампон, доведена до кипения и охлаждена при комнатной температуре.
[29]Для приготовления водной фазы мази к 12 г кристаллического желатина было добавлено 345 мл культуральной жидкости чайного гриба. Смесь была оставлена на 30 минут при комнатной температуре, после чего помещена в термостат при температуре 60°C на 80 минут, до полного растворения желатина.
[30]Для приготовления масляной фазы мази была приготовлена смесь 100 мл глицерина с 54 мл масла миндаля, к которой было добавлено 16 г порошка лецинола (гидрогенизированный лецитин). Смесь была помещена на лабораторное перемешивающее устройство при температуре 66°C и частоте вращения 185 об/мин на 80 минут, до полного растворения лецитина.
[31]В дальнейшем было произведено соединение водной и масляной фаз с добавлением 2 г порошка анестезина и 1,5 мл эфирного масла чайного дерева. Полученная субстанция смешивалась посредством погружного гомогенизатора в течение 10 мин. до образования стабильной эмульсии кремового цвета, была охлаждена при комнатной температуре в течение 30 мин., а затем расфасована в герметичные контейнеры и помещена в холодильную камеру при температуре 3,1°C.
[32]Чайный гриб (Medusomyces Gisevii Lindau) - симбиотический организм, представляющий собой микробный консорциум, состоящий из культур дрожжеподобных грибов и уксуснокислых бактерий. Культуральная жидкость формируется посредством ферментации настоя черного чая с добавлением сахара при инкубации при температуре 17-35°C в аэробных условиях. В процессе ферментации дрожжи сбраживают сахара с образованием этилового спирта и углекислоты, с дальнейшим окислением спирта бактериями до образования уксусной кислоты. Финальный продукт насыщен углекислым газом и имеет рН 2,5-4,5 [7-8].
[33]Химический состав культуральной жидкости чайного гриба весьма сложен и включает следующие группы веществ:
[34]1. Кислоты органические: уксусная, глюконовая, щавелевая, лимонная, яблочная, молочная, пировиноградная, койевая;
[36]3. Витамины: аскорбиновая кислота, тиамин;
[37]4. Ферменты: каталаза, липаза, протеаза, карбогидраза;
[38]5. Липиды: стерины, фосфатиды, жирные кислоты;
[39]6. Сахара: моносахариды, дисахариды;
[40]7. Пигменты: хлорофилл, ксантофилл;
[41]8. Пуриновые основания из чайного листа;
[42]9. Смолы и таннины из чайного листа;
[43]10. Антибиотические вещества [9].
[44]Культуральная жидкость чайного гриба проявляет выраженную антимикробную активность против достаточно широкого ряда патогенных микроорганизмов, относящихся, в частности, к родам Staphylococcus, Shigella, Escherichia, Aeromonas, Pseudomonas, Enterobacter, Salmonella, Bacillus и др. Отчасти данный эффект может быть быть следствием способности уксусной кислоты ингибировать рост ряда микроорганизмов, однако антимикробная способность культуральной жидкости чайного гриба сохраняется даже при нейтральном рН и после термической денатурации [10].
[45]Бензокаин - местный анестетик для поверхностной анестезии. Уменьшает проницаемость клеточной мембраны для Na+, вытесняет Са2+ из рецепторов, расположенных на внутренней поверхности мембраны, блокирует проведение нервных импульсов. Препятствует возникновению болевых импульсов в окончаниях чувствительных нервов и их проведению по нервным волокнам. При нанесении на поверхность слизистой оболочки полости рта действие развивается через 1 мин [11].
[46]Желатин - обратимо коагулирующий коллоид, получаемый из фибриллярного белка коллагена путем вываривания в воде шкур животных, костей, хрящей или сухожилий, т.е. материала, в котором содержится коллаген. Почти 20% веса желатина составляет аминокислота глицин. Получение желатина сходно с получением клея, но вываривание в процессе приготовления желатина длится не столь долго и не приводит к полной деградации коллагена до жидких конечных продуктов. Желатин способствует ускорению коллагенизации раны в процессе заживления [12].
[47]Масло миндальных орехов активирует метаболические процессы в соединительной ткани, стимулирует выработку коллагена, ускоряя коллагенизацию раны при заживлении. Эфирное масло чайного дерева обладает антисептическим, противогрибковым, противовирусным, противовоспалительным, регенерирующим и иммуностимулирующим действием. Масло эффективно подавляет рост таких бактерий, как стафилококки, стрептококки, пневмококки, гонококки, кишечная палочка и ряда других, а также грибковой флоры. Дезинфицирующие свойства масла используются в медицине, гигиене, косметологии. Масло способствует устранению угревой сыпи, бородавок, папиллом, перхоти, грибковых поражений кожи, эффективно при укусах насекомых, ссадинах, порезах. Укрепляет волосяные фолликулы, что улучшает рост и структуру волос [13].
[48]Глицерин способствует повышению гидратации кожи, облегчает зуд, препятствует развитию воспаления. При изготовлении средств наружного применения глицерин также используется в качестве пластификатора, способствующего сохранению однородной структуры препарата [14].
[49]Лецинол, сохраняя все основные положительные качества натурального лецитина, обладает, к тому же, высокой стабильностью. При разведении в воде, образует стабильные липосомы, благодаря которым можно формировать устойчивые водо- и жирорастворимые субстанции. Благодаря высокой проникающей способности, способствует проникновению в кожу других активных ингредиентов, эффективно увеличивает эффективность синергичных по действию компонентов. Это значительно увеличивает увлажненность кожи и уменьшает потертости и шероховатость кожи. Кроме того, устраняет раздражения, вызванные другими компонентами.
[50]Благодаря выбранному количественному соотношению компонентов состав имеет оптимальную для использования консистенцию, т.е. не застывает, образуя корку, и не растекается по поверхности обрабатываемой раны.
[51]Вязкость препарата (мази) при указанных количественных соотношениях компонентов соответствует фармакологическим свойствам мазевого препарата, приготовленного на водорастворимой основе. Его лечебные функции оптимальны, медикаментозные данные соответствуют требованиям для препаратов данной группы.
[52]Результат испытания ранозаживляющей противовоспалительной мази на белых лабораторных крысах линии Вистар в сравнительном аспекте.
[53]Исследование влияния ранозаживляющей противовоспалительной мази по следующей методике.
[54]Эксперимент проведен на белых крысах-самцах линии Вистар массой 200-220 г. Животные были разделены на три групп по 20 особей в каждой.
[55]У всех крыс под ингаляционным наркозом по трафарету области спины иссекали участок кожи 400 мм2 (с подкожной клетчаткой).
[56]В I группе животных (контрольной) дефект заживал под струпом.
[57]Во II группе животных применяли мазь «Солкосерил», выбранной в качестве препарата сравнения, в дозировке 0,5 мл с помощью шприца.
[58]В III группе животных применяли предлагаемый мазь на основе чайного гриба, в дозировке 0,5 мл с помощью шприца.
[59]Каждые сутки эксперимента проводили вульнографию. Для этого на образовавшуюся рану накладывали прозрачную пленку, переносили контурыран, сканировали и вычисляли их площадь при помощи программы Axio-vision 4.8.
[60]За животными наблюдали до 15 дня, учитывая при этом внешний вид зоны повреждения
[61]В Таблице 2 приведены данные, характеризующие ранозаживляющее действие предлагаемого средства в сравнении с контрольной группой (без лечения) и с известной мазью (Солкосерил).
[62]
[63]Здесь и далее: * - достоверность отличий от контроля (* - р≤0,05; ** - р≤0,005; *** - р≤0,0005) по результатам расчета t-критерия Стьюдента,
[65]Результаты оценки состояния раны в течение исследования представлены в Таблице 3.
[66]
[67]
[68]Для изучения динамики процессов репаративной регенерации в поврежденной ткани оценивались также гематологические показатели.
[69]Из результатов гематологического анализа следует, что в период после нанесения раны у животных происходит постепенная нормализация исследованных гематологических параметров (количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина крови), но в группе животных, где применялось заявляемое ранозаживляющее средство, этот процесс протекает более интенсивно, и нормализация гематологических показателей завершается к 10-м суткам наблюдения, в то время как в контроле и в группе, в которой применялся Солкосерил - к 15 суткам (Таблица 4).
[70]
[71]
[72]Предлагаемое изобретение за счет своего состава имеет следующие преимущества по сравнению с другими известными техническими решениями:
[73]- повышение противовоспалительных, регенерирующих, антиоксидантных и антимикробных свойств;
[74]- отсутствие аллергического действия;
[75]- является экологически чистым препаратом.
[77]1. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский, М.: Медицина, 2012, 1216 с.
[78]2. Коган Г.Я. Технология лекарственных форм / Г.Я. Коган, М.: Медгиз, 1992, 383 с.
[79]3. Пат. РФ 2044541, 1995, кл. А61K 9/52.
[80]4. Пат. США 5034228, кл. А61K 87/22, 1991.
[81]5. Пат. США 4816271, кл. А61K 7/40, 1989.
[82]6. Пат. Фр. 2668366, кл. А61K 7/48, 1992.
[83]7. Пат. RU 2153816. кл. A25L 2/00, 2000.
[84]8. Пат. RU 2480519. кл. C12G 3/02, 4.2013.
[85]9. Sreeramulu, G. Kombucha fermentation and its antimicrobial activity / G. Sreeramulu, Y. Zhu, W. Knol // J Agric Food Chem. - 2000. - Vol. 48. - №6. - P. 2589-2594.
[86]10. Даниелян, Л.Т. Чайный гриб и его биологические особенности / Л.Т. Даниелян. - М.: «Медицина», 2005. - 83 с.
[87]11. Araujo De, D.R. Bioadhesive films containing benzocaine: correlation between in vitro permeation and in vivo local anesthetic effect / D.R. de Araujo, C. Padula, C.M. Cereda, G.R. Tofoli, R.B. Brito Jr, E. de Paula et al. // Pharmaceutical research. - 2010. - Vol. 27. - №8. - P. 1677-1686.
[88]12. Morimoto, N. Exploratory clinical trial of combination wound therapy with a gelatin sheet and platelet-rich plasma in patients with chronic skin ulcers: study protocol / N. Morimoto, N. Kakudo, M. Matsui, T. Ogura, Т. Hara, K. Suzuki et al. / BMJ Open. - 2015. - Vol. 5. - №5. - e007733.
[89]13. Ahmad, Z. The uses and properties of almond oil / Z. Ahmad // Complementary therapies in clinical practice. - 2010. - Vol. 16. - №1. - P. 10-12.
[90]14. Aramwit, P. Improvement of physical and wound adhesion properties of silk sericin and polyvinyl alcohol dressing using glycerin / P. Aramwit, J. Ratanav-araporn, T. Siritientong // Advances in Skin & Wound Care. - 2015. - Vol. 28. - №8 - P. 358-367.
- достоверность отличий между группами 1 и 2 (
- р≤0,05; 
- р≤0,005; 
- р≤0,0005)
